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急急:连接问题!!!!!
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我用BamHⅠ和XhoI双酶切Pet-32a和目的片段(1133bp),切胶回收后用T4连接酶连接,请问连接的时间和温度应该如何?XhoI需要平末端的连接条件吗?体系大概多少比较好?谢谢!!! 我转化效率都好低,长的几个菌用BamHⅠ和XhoI双酶切切出1500BP的带,酶活也测不出。 |
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