24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 950  |  回复: 16
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

190582353

木虫 (小有名气)

[交流] 求助 琼脂糖凝胶上回收PCR产物

用PCR产物回收试剂盒尝试从琼脂糖凝胶上回收PCR 产物,但每次用回收的溶液再次电泳都得不到条带,我用的是无菌水洗脱,时间为20分钟,洗脱前55度预热, 同时尝试过TE(PH约为8)仍然得不到条带。哪位高手做过类似的实验,请赐教,不胜感激!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hfztim

至尊木虫 (正式写手)

★ ★ ★
asr(金币+3,VIP+0):谢谢,辛苦了。欢迎常来 :-)
可能的原因:1.你的琼脂糖凝胶溶化了吗?一般要溶个10分钟左右。
2.洗脱时用的水量是不是太多?一般用20ul就可以了。
3.回收的溶液再次电泳时取了几微升上样?一般要5ul左右。
另外PCR产物一般情况下不需要琼脂糖凝胶回收的,你可以按这个方法做:
1.PCR产物转移至1.5ml离心管,加TE至400ul,加2倍乙醇和1/10乙酸钠,12000rpm 5m
2.75%乙醇洗涤,加TE溶解即可。
4楼2008-04-18 17:39:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

可能是量少吧,电泳的时候检测不到。试剂盒回收按照提供的步骤一般问题不大的。
活着就要让人感受到你的存在。
2楼2008-04-18 15:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guo1983752

银虫 (初入文坛)

你用的什么试剂盒啊?
一般的试剂盒都配有洗脱液啊!我从来都是用专门的洗脱液
3楼2008-04-18 15:47:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)

两点建议:
1、把说明书再仔细研究一下,确定每一步都没有疑问了再做
2、回收的过程保证干净、无污染
    回收很少会出问题的,即使有问题也是很容易就可以找到原因的,不会浪费较多的时间,加油哦!
5楼2008-04-18 19:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 329求调剂 +7 星野? 2026-03-26 7/350 2026-03-29 06:43 by 544594351
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 一志愿北京工业大学,324分求调剂 +4 零八# 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:01 by 17865157980
[考研] 求化学调剂 +4 wulanna 2026-03-28 4/200 2026-03-28 13:37 by 唐沐儿
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 349求调剂 +4 李木子啊哈哈 2026-03-25 4/200 2026-03-26 22:49 by fmesaito
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗? +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
请填处理意见