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qingshuichen

铜虫 (小有名气)

[求助] 羊抗鼠二抗包板的稳定性问题 已有2人参与

本人用羊抗鼠二抗IgM包板做Elisa实验,但是发现羊抗鼠二抗下降很快,4℃放置一天,荧光值下降一半。包被液用的是PH7.0的PBS,封闭液用的是PH7.0的PBS含0.05%的吐温。有那位曾经遇到个这个情况吗?听我们研发总监说这类二抗非常稳定的,找了很久,没找到原因,现在项目停滞,着急,希望知道的给与帮助,先谢过了。答案有帮助,您需要金币的话,我可以多送些。
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lifeshouldbesplendid
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lxuanyil

木虫 (小有名气)

酶呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-09-07 23:36:30
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qingshuichen

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lxuanyil at 2014-09-07 23:36:30
酶呢?

什么酶啊,没看懂您的回答
lifeshouldbesplendid
3楼2014-09-09 09:52:45
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feiyue122

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
qingshuichen: 金币+2, 有帮助 2015-01-28 12:16:48
主要是你的封闭液,没有对你的包被抗体产生保护作用,所以抗体在浓度很稀的时候,活性下降时比较大的。
4楼2015-01-27 12:37:14
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feiyue122

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
qingshuichen: 金币+2, 有帮助 2015-01-28 12:17:13
封闭液里都是要加蛋白类物质的,所以你包被微孔板中抗体的活性下降很快
5楼2015-01-27 12:38:34
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anliang

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

封闭液有问题。我们实验室常用的是1%的人血清白蛋白,或者3%的牛血清白蛋白;都用PBS来配取获得。另外,不知道你打算做什么实验,没见过用二抗来包被的。二抗一般都是最后加上反应,然后TMB显色,10%硫酸终止。
6楼2016-07-26 10:45:19
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