24小时热门版块排行榜    

查看: 1847  |  回复: 14

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 09:20:42
楼上已经提到解决方法,表示赞同:1. 以没有酶切位点的PCR产物(稀释100倍)为模版重新PCR;2.直接TA克隆,将没有酶切位点的PCR产物(Taq酶)克隆T载体,然后亚克隆;3.摸索PCR条件
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
11楼2014-09-07 08:15:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北化方华

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by jennifermatt at 2014-09-05 09:00:05
你是什么体系扩增?我以前用15ulP不出来,换25ul体系就批出来了。可以换一下体系。

我用的是25ul的呢
12楼2014-09-09 14:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北化方华

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lqx2006 at 2014-09-05 09:09:16
设计引物最重要的是没错误引发,两条引物的tm不超过5,如果引物特异性高,酶切位点影响就不怎么大了,当然,如果你的序列没什么保密性,可以内信我,我帮你从新设计

你的邮箱多少发给你
13楼2014-09-09 15:00:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mushroom1993

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lqx2006 at 2014-09-05 09:09:16
设计引物最重要的是没错误引发,两条引物的tm不超过5,如果引物特异性高,酶切位点影响就不怎么大了,当然,如果你的序列没什么保密性,可以内信我,我帮你从新设计

能帮我设计一下引物么?多酚氧化酶的,用于RT-PCR
天道酬勤
14楼2014-11-21 22:05:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天地一微尘

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

先用不加酶切位点的引物扩增。以扩增后的产物为模板,再用加了酶切位点的引物来扩增试试。
15楼2014-11-22 10:05:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 北化方华 的主题更新
信息提示
请填处理意见