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鬼羽帝魂木虫 (著名写手)
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大片段连接大载体难以连接的问题 已有4人参与
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最近做实验,大片段连接大载体。 载体、片段用相同的酶双酶切后回收,再连接。 (1)载体10000、片段4000,(2)载体12700、片段4334,改变体系做了3次。 第一次(1)长了1个,(2)长了好多,但是酶切验证都不对 第二次,第三次都没长单克隆。 连接时载体:片段为1:5,最大试过1:10,16度过夜或者8小时以上。 甚至,我连接酶都加了2ul(10ul的体系) 卡住了我在这,求指导,谢谢。 |
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鬼羽帝魂
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