24小时热门版块排行榜    

查看: 3977  |  回复: 10

hbsdz

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白偶联核酸的问题 已有1人参与

我现在在做蛋白连接DNA,但总是连接不上,不知道在哪个地方出问题了,有没有哪位高人再做这方面的,希望可以指点一二,不甚感激!
具体,PH值9,硼氢化钠4mg/ml,。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我的邮箱:hbsdzml@163.com
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaolijunzlj

铜虫 (小有名气)

可以具体一点吗?你是准备怎么接,然后接不上去
我的事情我做主
2楼2014-09-05 19:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbsdz

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaolijunzlj at 2014-09-05 19:35:32
可以具体一点吗?你是准备怎么接,然后接不上去

您好,我在DNA上标记醛基,然后利用醛基与蛋白上的氨基发生反应。但是,还不想让DNA上的氨基等基团与标记的醛基自身发生反应。顺便问您一下,您也做这方面的实验吗?希望可以深入交流一下,非常感谢!
我的邮箱:hbsdzml@163.com
3楼2014-09-05 19:55:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaolijunzlj

铜虫 (小有名气)

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-04 12:47:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by hbsdz at 2014-09-05 19:55:12
您好,我在DNA上标记醛基,然后利用醛基与蛋白上的氨基发生反应。但是,还不想让DNA上的氨基等基团与标记的醛基自身发生反应。顺便问您一下,您也做这方面的实验吗?希望可以深入交流一下,非常感谢!...

哈哈,我以前是做有机的,现在也转战生物分析这块,也是刚刚接触,不过感觉在生物条件下,要防止DNA本身的氨基与醛基反应是有点难的,找找能不能对蛋白上的氨基进行下活化,然后估计就可以解决这个问题了,具体的氨基活化方法你在查一下,以前见过的
我的事情我做主
4楼2014-09-05 20:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaolijunzlj

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hbsdz at 2014-09-05 19:55:12
您好,我在DNA上标记醛基,然后利用醛基与蛋白上的氨基发生反应。但是,还不想让DNA上的氨基等基团与标记的醛基自身发生反应。顺便问您一下,您也做这方面的实验吗?希望可以深入交流一下,非常感谢!...

顺便问一下,你是哪个学校的呢?
我的事情我做主
5楼2014-09-05 20:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hejian66

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主

这个比较困难,空间位阻较大,其次氨基酸中胺的亲核性不是很高,估计你得需要一些催化剂。其次建议你详查一下文献,相关的报道多关注一下

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-11-03 21:00:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbsdz

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hejian66 at 2014-11-03 21:00:04
这个比较困难,空间位阻较大,其次氨基酸中胺的亲核性不是很高,估计你得需要一些催化剂。其次建议你详查一下文献,相关的报道多关注一下

谢谢,我在找找其他条件,看看可不可以吧!非常感谢你的建议!
我的邮箱:hbsdzml@163.com
7楼2014-11-04 16:46:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

这个反应用于蛋白偶联一般非常慢,要4个小时以上
还有一般都是用NaB(CN)H3 不用NaBH4 我也不知道为什么
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
8楼2014-11-05 03:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbsdz

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-11-05 03:35:45
这个反应用于蛋白偶联一般非常慢,要4个小时以上
还有一般都是用NaB(CN)H3 不用NaBH4 我也不知道为什么

非常感谢!我现在已经不再自己直接接了常,我买了胶联剂,现在直接胶联就可以了!非常感谢你的建议!谢谢!如果后续工作要接,我一定试试!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我的邮箱:hbsdzml@163.com
9楼2014-11-05 06:54:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ly889264

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hbsdz at 2014-11-05 06:54:05
非常感谢!我现在已经不再自己直接接了常,我买了胶联剂,现在直接胶联就可以了!非常感谢你的建议!谢谢!如果后续工作要接,我一定试试!
...

你好!能问一下你用的什么交联剂?最近也需要将DNA偶联到蛋白上,谢谢了
永不背弃,永不放弃
10楼2016-02-13 06:09:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hbsdz 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:46 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 5/250 2026-02-08 08:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:26 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:12 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[硕博家园] 博士延得我,科研能力直往上蹿 +8 偏振片 2026-02-02 8/400 2026-02-08 06:52 by liyeqik
[教师之家] 有院领导为了换新车,用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目,第1个项目里不写第2个项目的信息,可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生,欢迎大家推荐交流(博导是本人) +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生|MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
请填处理意见