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oasis9090

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么用激光散射仪测天然高分子的分子量 已有2人参与

测天然高分子的分子量(其粘均分子量30万左右),示差的信号很强,但激光扫描仪(Wyatt,18角)上却没有信号,
高分子是用 醋酸/醋酸铵缓冲液溶解的,0.1-5mg/ml的都试过,进样量20ul,流动相也是用的这个做缓冲液 。
这是为什么呀  求大神!!!
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“喵”
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Mr__Right

专家顾问 (著名写手)

这种情况应该找负责仪器的老师给你培训下;
文章乃身外之物,要多考虑编辑、审稿人和读者的感受。
2楼2014-09-03 17:04:45
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fyjqt

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
oasis9090: 金币+10, 有帮助 2014-09-04 09:35:22
示差信号很强,且流动相和进样溶剂没有差别,是不应该出现光散射上无信号的,你确认一下是“无信号”还是“超出检测范围”,即,检查一下散射光强是否有明显增强(远不是只有几倍的增强,可能有几万倍甚至更多)。
私下学术交流可以邮件corphere@gmail.com。站内消息有时会忽略。
3楼2014-09-03 17:09:11
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叶客诚

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
oasis9090: 金币+2 2014-09-04 09:47:03
这里应该用动/静态激光散射仪中的静态光散射测量,而且这里测得应该是重均分子量。具体的操作自己可以查查资料.
Let me be a quiet and handsomeboy.
4楼2014-09-03 21:32:38
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oasis9090

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fyjqt at 2014-09-03 17:09:11
示差信号很强,且流动相和进样溶剂没有差别,是不应该出现光散射上无信号的,你确认一下是“无信号”还是“超出检测范围”,即,检查一下散射光强是否有明显增强(远不是只有几倍的增强,可能有几万倍甚至更多)。

散射上没信号跟没进样时差不多,没有明显增强,基线一直波动比较大,基本上维持在第三位小数(v) 用的是屈臣氏的蒸馏水,0.45um过滤的
“喵”
5楼2014-09-04 09:38:15
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oasis9090

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 叶客诚 at 2014-09-03 21:32:38
这里应该用动/静态激光散射仪中的静态光散射测量,而且这里测得应该是重均分子量。具体的操作自己可以查查资料.

用的就是静态呀!!!!
“喵”
6楼2014-09-04 09:47:20
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fyjqt

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
oasis9090: 金币+5, 有帮助 2014-09-05 16:38:47
引用回帖:
5楼: Originally posted by oasis9090 at 2014-09-04 09:38:15
散射上没信号跟没进样时差不多,没有明显增强,基线一直波动比较大,基本上维持在第三位小数(v) 用的是屈臣氏的蒸馏水,0.45um过滤的...

理论上不应该这样的,我觉得是仪器或是操作上的问题。
你可以做的:
1、如果附近有粒径仪、静动态散射仪、浊度仪等其它仪器,你可以用样品去试试,看看有没有明显的散射。或者,你可以用激光笔在侧面照射瓶子,看看是否和纯溶剂有明显的区别。
2、用一个其它的已知样品,看看你这台仪器是否有问题。
3、换个缓冲液试试,主要是改变缓冲液的浓度,稀和浓都可以试试。不知道是不是太浓导致了盐析。
私下学术交流可以邮件corphere@gmail.com。站内消息有时会忽略。
7楼2014-09-04 11:36:41
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oasis9090

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by fyjqt at 2014-09-04 11:36:41
理论上不应该这样的,我觉得是仪器或是操作上的问题。
你可以做的:
1、如果附近有粒径仪、静动态散射仪、浊度仪等其它仪器,你可以用样品去试试,看看有没有明显的散射。或者,你可以用激光笔在侧面照射瓶子,看 ...

应该不是这些问题  现在订了一个大的定量环再试试吧!
“喵”
8楼2014-09-05 16:39:22
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