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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 为什么我冻存的细胞复苏出来活的细胞很少？
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Luse_91

新虫 (著名写手)

[求助] 为什么我冻存的细胞复苏出来活的细胞很少？ 已有1人参与

如题，我的冻存液是培养基：FBS：DMSO=7：2：1，而且陪玩也放回四度冷却了，冻存盒用之前也平衡到室温了，但是复苏出来之后，细胞活着的还是只有几个。我就不明白了这是怎么回事？各位大神能否帮我解惑？谢谢~~
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1楼 2014-09-02 10:47:36
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Luse_91

新虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 思行1993 at 2014-09-03 00:28:49
复苏方法是怎样的？你是冻存液直接补液培养第二天换液，还是离心再培养，一般我选择前者，效果还不错啊，你复苏的时候是在冰点时间留长了？

速溶——加1ml培养基——离心——重悬——培养，都是从液氮罐拿出来就拿到37度水浴速溶。复苏应该是没有问题，就是在冻存的时候，不知道除了什么问题，我拿别人的细胞来复苏就挺好的！
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12楼2014-09-04 12:43:00
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尘香驻风

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Luse_91: 金币+20, ★有帮助 2014-09-02 15:27:38
1.我通常用的冻存液都是FBS：DMSO=9:1，这样虽然比较费血清，但冻存效果很好。你换这个冻存液试试，看看是不是冻存液不好。
2.冻存的密度也有影响，也许你可以试试冻大一点的密度。
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2楼2014-09-02 13:41:46
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Luse_91

新虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 尘香驻风 at 2014-09-02 13:41:46
1.我通常用的冻存液都是FBS：DMSO=9:1，这样虽然比较费血清，但冻存效果很好。你换这个冻存液试试，看看是不是冻存液不好。
2.冻存的密度也有影响，也许你可以试试冻大一点的密度。

我细胞冻存得很多，就是复苏出来活着的不多，我冻存的跟他们的都是一样的做法，我就不明白，别人的细胞复苏出来很好啊，就我的有问题。
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3楼2014-09-02 14:47:35
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尘香驻风

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Luse_91 at 2014-09-02 14:47:35
我细胞冻存得很多，就是复苏出来活着的不多，我冻存的跟他们的都是一样的做法，我就不明白，别人的细胞复苏出来很好啊，就我的有问题。...

会不会是你的细胞本身状态不好？
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4楼2014-09-02 15:21:19
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