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hongkaichen金虫 (小有名气)
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[交流]
求助,关于DNA提取问题。
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我想问下,我用CTAB法提取真菌DNA(菇类,还有一些其他的真菌)提出的带经常是好长的尾巴,但要的DNA好像没有。 我的CATB法是这样的,先用液氮研磨(菇类的不好研)有时也用烘干后研磨的粉末,然后加入预热的CTAB缓冲液(用粉末的时候还加入过蛋白酶K,用液氮研磨的时候也加过),65度水浴30分钟,有时也水浴过2个小时或更长时间,然后就是12000g离心5分钟,取上清加入等体积的氯仿:异戊醇(24:1),有时也直接用氯仿提,再12000g离心5分钟,取上清,重复上一步2-3次,直到没有蛋白质为止,然后加入2倍体积的乙醇和1/10体积的醋酸铵(由于没有醋酸铵加的是),静置10分钟,12000g离心10分钟,弃上清,用百分之70的乙醇清洗 ,再用TE溶解,再跑电泳,跑出来的带如图,有一次担到了但杂质特多,希望哪位好人能帮忙解释下!!谢谢!! [ Last edited by hongkaichen on 2008-4-18 at 18:09 ] |
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