24小时热门版块排行榜    

查看: 2478  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

LisaT_PUMC

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手养Hela细胞,总是有成团的现象,感觉是重悬出了问题,求助技巧!!! 已有3人参与

如题…

细胞贴壁生长后,镜下总能看到几个细胞聚成一团生长,密度达到80-90%时位于团块中心的细胞状态就很不好了。个人感觉是细胞重悬出了问题,但每次吹打、混合时都操作了20次左右,肉眼也看不到团块,不知道该怎么改进操作啊>_<…………

养了快两个月了一直是这种状态,细胞分不匀影响后续实验,急啊……求大虾们给些技术上的建议,多谢了!!!!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by LisaT_PUMC at 2014-09-01 09:28:16
吹完后确实没有镜检…这个时候应该看什么?如果发现有成团细胞该咋做?谢谢~^ ^
...

消化不充分成团,长起来还是成团长,再消化时成团的部分还是消化不够,还是成团。
要不你尝试轻微的消化,消化下来接新瓶,这些细胞应该是散的。

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-09-01 12:37:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从前养一次上皮细胞也出现成团,甚至不贴壁,别人给看了说是消化过头了
还有一次养别的细胞,消化不太够,细胞不好吹散,有很多成团的。
不知道你是不是消化控制得不好

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-09-01 07:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你的说法,吹完后没在显微镜下看看呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-09-01 07:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是消化时间没有掌握好,把细胞消化至缩回来变圆,但有没有从壁上脱落下来,这种状态就一吹全部都是散的细胞。
不同状态的细胞消化时间不太一样,可以适当稀释胰酶,直接在室温消化,一直观察,也可以在37度放2min就拿出来,自己摸索好时间。
消化过了细胞成团脱落,如果一直掌握不好的话,就不如牺牲一些细胞,只保留部分比较散的细胞,hela只要养起来就基本是疯长的。
前面也有虫子提到过,吹了之后要到显微镜下看看才行啊
你的日子如何,你的力量也必如何!
4楼2014-09-01 09:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 3/150 2026-08-29 03:23 by gy1nBQXYQJqL
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 3/150 2026-08-29 03:03 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-29 00:28 by winsaint
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见