24小时热门版块排行榜    

查看: 2476  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

LisaT_PUMC

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手养Hela细胞,总是有成团的现象,感觉是重悬出了问题,求助技巧!!! 已有3人参与

如题…

细胞贴壁生长后,镜下总能看到几个细胞聚成一团生长,密度达到80-90%时位于团块中心的细胞状态就很不好了。个人感觉是细胞重悬出了问题,但每次吹打、混合时都操作了20次左右,肉眼也看不到团块,不知道该怎么改进操作啊>_<…………

养了快两个月了一直是这种状态,细胞分不匀影响后续实验,急啊……求大虾们给些技术上的建议,多谢了!!!!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是消化时间没有掌握好,把细胞消化至缩回来变圆,但有没有从壁上脱落下来,这种状态就一吹全部都是散的细胞。
不同状态的细胞消化时间不太一样,可以适当稀释胰酶,直接在室温消化,一直观察,也可以在37度放2min就拿出来,自己摸索好时间。
消化过了细胞成团脱落,如果一直掌握不好的话,就不如牺牲一些细胞,只保留部分比较散的细胞,hela只要养起来就基本是疯长的。
前面也有虫子提到过,吹了之后要到显微镜下看看才行啊
你的日子如何,你的力量也必如何!
4楼2014-09-01 09:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从前养一次上皮细胞也出现成团,甚至不贴壁,别人给看了说是消化过头了
还有一次养别的细胞,消化不太够,细胞不好吹散,有很多成团的。
不知道你是不是消化控制得不好

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-09-01 07:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你的说法,吹完后没在显微镜下看看呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-09-01 07:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LisaT_PUMC

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sxxuan at 2014-09-01 09:21:52
应该是消化时间没有掌握好,把细胞消化至缩回来变圆,但有没有从壁上脱落下来,这种状态就一吹全部都是散的细胞。
不同状态的细胞消化时间不太一样,可以适当稀释胰酶,直接在室温消化,一直观察,也可以在37度放2 ...

谢谢~!不过要怎么分离成团的细胞和分散的细胞?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-09-01 09:24:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见