24小时热门版块排行榜    

查看: 2158  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

LisaT_PUMC

新虫 (初入文坛)

[求助] 新手养Hela细胞,总是有成团的现象,感觉是重悬出了问题,求助技巧!!! 已有3人参与

如题…

细胞贴壁生长后,镜下总能看到几个细胞聚成一团生长,密度达到80-90%时位于团块中心的细胞状态就很不好了。个人感觉是细胞重悬出了问题,但每次吹打、混合时都操作了20次左右,肉眼也看不到团块,不知道该怎么改进操作啊>_<…………

养了快两个月了一直是这种状态,细胞分不匀影响后续实验,急啊……求大虾们给些技术上的建议,多谢了!!!!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细胞成团有两个最基本原因:1、不管消化不够还是消化过头,消化不够细胞本身就是成团的,消化过头单个细胞会抱团,所以吹打很关键,一定要吹打细胞成单个状态;2、传代接种一定要铺的均匀,不然细胞还是会抱团生长;最后接种完毕一定要显微镜下观察!
8楼2014-09-01 10:40:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从前养一次上皮细胞也出现成团,甚至不贴壁,别人给看了说是消化过头了
还有一次养别的细胞,消化不太够,细胞不好吹散,有很多成团的。
不知道你是不是消化控制得不好

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-09-01 07:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

璧月

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你的说法,吹完后没在显微镜下看看呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-09-01 07:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是消化时间没有掌握好,把细胞消化至缩回来变圆,但有没有从壁上脱落下来,这种状态就一吹全部都是散的细胞。
不同状态的细胞消化时间不太一样,可以适当稀释胰酶,直接在室温消化,一直观察,也可以在37度放2min就拿出来,自己摸索好时间。
消化过了细胞成团脱落,如果一直掌握不好的话,就不如牺牲一些细胞,只保留部分比较散的细胞,hela只要养起来就基本是疯长的。
前面也有虫子提到过,吹了之后要到显微镜下看看才行啊
你的日子如何,你的力量也必如何!
4楼2014-09-01 09:21:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 15/750 2026-03-21 10:16 by 脱颖而出
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸! 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 281求调剂(0805) +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
请填处理意见