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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母表达重组蛋白遇到大难题
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邱玉信

禁虫 (小有名气)
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1楼 2014-08-31 19:08:00
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miclebibi

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 邱玉信 at 2014-09-01 22:08:56
你好，如果做westen我想问下怎样设计相关重组蛋白的抗体呢？...

抗体的选择可以上NCBI检索Protein中你的目的蛋白，右侧有一个抗体的链接（连到http://www.labome.com）上面有该抗体哪些公司有，你的蛋白应该很好找的
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14楼2014-09-02 12:04:56
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★ ★
邱玉信(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-01 19:23:04
(1)外源蛋白在毕赤酵母中不能得到表达也是常见的。可以通过优化基因序列，启动子以及分泌信号等来尝试解决一下，但不要抱太大期望。
（2）如果你的蛋白有糖基化位点的话分子量可能会增加。
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-31 21:47:00
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邱玉信

禁虫 (小有名气)
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3楼2014-08-31 22:17:22
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 邱玉信 at 2014-08-31 22:17:22
首先谢谢你！我没有说我的外源蛋白没有表达，我的意思是说就算外源蛋白表达了，用上面这两种方法也很难验证，想请教一下还有其它的方法不？...

从电泳结果看，至少可以说没有明显的表达条带。即使有微量的表达，以后的纯化也很难做的。
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4楼2014-08-31 22:26:21
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