应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 一种革兰氏阴性野生菌的感受态制备，请教关键环节！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 1924  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

charles08

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 一种革兰氏阴性野生菌的感受态制备，请教关键环节！ 已有2人参与

最近在制备革兰氏阴性菌的感受态细胞，做了4-5次了，依然没有成功。都是按分子克隆上的操作来的

化学转化后始终得不到阳性转化子，发现这种野生菌株真难转化

但是这还是一种革兰氏阴性细菌，应该是比较好做的啊，
请教各位

有经验的可以介绍介绍，到底制备野生菌株的时候需要注意哪些关键环节
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-30 12:03:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风徐来111

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
charles08(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-09-02 20:21:54
不同细菌的敏感性都不一样的，对于野生菌的转化从来就是创新性的题目，遇到困难并不奇怪。
有的野生菌自身具有修复系统，外源的DNA会被清除掉的。建议尝试分离、改造并使用其自身具有的质粒进行转化。
建议尝试一下电击法。曾经有一个同事做革兰氏阴性厌氧菌转化，只有用电击法才能够获得很低的转化效率，尝试的其他方法均失败。
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-02 10:53:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 清风徐来111 at 2014-09-02 10:53:16
不同细菌的敏感性都不一样的，对于野生菌的转化从来就是创新性的题目，遇到困难并不奇怪。
有的野生菌自身具有修复系统，外源的DNA会被清除掉的。建议尝试分离、改造并使用其自身具有的质粒进行转化。
建议尝试一 ...

非常感谢，您和您的同事也曾经做过这个方面的研究吗》
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-02 12:31:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 清风徐来111 at 2014-09-02 10:53:16
不同细菌的敏感性都不一样的，对于野生菌的转化从来就是创新性的题目，遇到困难并不奇怪。
有的野生菌自身具有修复系统，外源的DNA会被清除掉的。建议尝试分离、改造并使用其自身具有的质粒进行转化。
建议尝试一 ...

如果您也做过，能否推荐些关键文献，谢谢

不好意思，虽然知道自己也可以检索，但是时间确实很感，老板催了
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-02 12:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风徐来111

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by charles08 at 2014-09-02 12:34:11
如果您也做过，能否推荐些关键文献，谢谢

不好意思，虽然知道自己也可以检索，但是时间确实很感，老板催了...

本人没有做过，也是很久以前的同事做过，现在也没有再联系了，不好意思。
赞一下 回复此楼
5楼2014-09-03 09:02:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

电击法是比较快的，相关的操作的注意事项你在木虫里找一下，有的是
赞一下(1人) 回复此楼
成功，就是成为你想成为的人
6楼2014-09-03 14:22:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhangbighui at 2014-09-03 14:22:20
电击法是比较快的，相关的操作的注意事项你在木虫里找一下，有的是

好的
回复此楼
7楼2014-09-04 11:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 charles08 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 081700化学工程与技术 一志愿中海洋 323 求调剂学校 +9 披星河 2026-04-03 9/450 2026-04-03 21:41 by lbsjt
[考研] 材料334求调剂 +9 Eecho# 2026-04-03 9/450 2026-04-03 21:38 by lbsjt
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 一志愿重庆大学085404，总分314分，求调剂 +4 zf83hn 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:25 by 啵啵啵0119
[考研] 295求调剂 +3 尚偌呀 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:23 by zhq0425
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
[考研] 一志愿华北电力大学（北京），材料科学与工程学硕265，求调剂 +9 yelck 2026-04-03 10/500 2026-04-03 13:20 by yelck
[考研] 286分调剂 +20 Faune 2026-03-30 22/1100 2026-04-02 13:24 by clyblh
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:10 by yulian1987
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 化学工程专硕324分，一志愿中国矿业大学求调剂 +7 耿耿1314 2026-04-01 7/350 2026-04-02 07:40 by 尚水阁主
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 267求调剂 +13 uiybh 2026-03-31 13/650 2026-04-01 10:25 by 探123
[考研] 301求调剂 +8 axibli 2026-04-01 8/400 2026-04-01 09:51 by 我的船我的海
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭