应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 一种革兰氏阴性野生菌的感受态制备，请教关键环节！
71/1返回列表
查看: 2113  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

charles08

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 一种革兰氏阴性野生菌的感受态制备，请教关键环节！ 已有2人参与

最近在制备革兰氏阴性菌的感受态细胞，做了4-5次了，依然没有成功。都是按分子克隆上的操作来的

化学转化后始终得不到阳性转化子，发现这种野生菌株真难转化

但是这还是一种革兰氏阴性细菌，应该是比较好做的啊，
请教各位

有经验的可以介绍介绍，到底制备野生菌株的时候需要注意哪些关键环节
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-30 12:03:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风徐来111

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
charles08(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-09-02 20:21:54
不同细菌的敏感性都不一样的，对于野生菌的转化从来就是创新性的题目，遇到困难并不奇怪。
有的野生菌自身具有修复系统，外源的DNA会被清除掉的。建议尝试分离、改造并使用其自身具有的质粒进行转化。
建议尝试一下电击法。曾经有一个同事做革兰氏阴性厌氧菌转化，只有用电击法才能够获得很低的转化效率，尝试的其他方法均失败。
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-02 10:53:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 清风徐来111 at 2014-09-02 10:53:16
不同细菌的敏感性都不一样的，对于野生菌的转化从来就是创新性的题目，遇到困难并不奇怪。
有的野生菌自身具有修复系统，外源的DNA会被清除掉的。建议尝试分离、改造并使用其自身具有的质粒进行转化。
建议尝试一 ...

非常感谢，您和您的同事也曾经做过这个方面的研究吗》
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-02 12:31:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 清风徐来111 at 2014-09-02 10:53:16
不同细菌的敏感性都不一样的，对于野生菌的转化从来就是创新性的题目，遇到困难并不奇怪。
有的野生菌自身具有修复系统，外源的DNA会被清除掉的。建议尝试分离、改造并使用其自身具有的质粒进行转化。
建议尝试一 ...

如果您也做过，能否推荐些关键文献，谢谢

不好意思，虽然知道自己也可以检索，但是时间确实很感，老板催了
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-02 12:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风徐来111

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by charles08 at 2014-09-02 12:34:11
如果您也做过，能否推荐些关键文献，谢谢

不好意思，虽然知道自己也可以检索，但是时间确实很感，老板催了...

本人没有做过，也是很久以前的同事做过，现在也没有再联系了，不好意思。
赞一下 回复此楼
5楼2014-09-03 09:02:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangbighui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

电击法是比较快的，相关的操作的注意事项你在木虫里找一下，有的是
赞一下(1人) 回复此楼
成功，就是成为你想成为的人
6楼2014-09-03 14:22:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhangbighui at 2014-09-03 14:22:20
电击法是比较快的，相关的操作的注意事项你在木虫里找一下，有的是

好的
回复此楼
7楼2014-09-04 11:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 charles08 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭