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朱珍

至尊木虫 (著名写手)

[求助] HPLC标准品和样品的保留时间相差接近1min 已有5人参与

求助!!
用液相分析样品时,标准品的保留时间一直在11.7分钟左右,做加标样品时,在11.7分钟时有峰出现,但是和加标浓度很不符合,反而在11.0分钟左右处出现和加标浓度相符合的峰,这样的情况会是样品峰么,还是说样品处理不当导致检测不出来?
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朱珍

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by qingdaofigo2091 at 2014-08-30 11:19:23
我觉得你要是能够上图,并且告知标品和样品的流动相、溶剂、pH等条件是什么,乃至物质的属性,也许虫友们会给你更大的帮助。

1.标准品是:邻酪氨酸
2.样品是:大菱鲆和鱿鱼
3.流动相是:0.02mol/L乙酸铵   乙腈
4.样品的处理方式是:样品经丙酮和三氯甲烷去脂后,用2mol/L HCl水解蛋白,标准品是在去脂后水解之前加入的,用安婄瓶在110℃水解24小时
5.PH条件:开始是按照文献中的碱性环境进行调节至PH为10左右,但是一直检测不出来,就将标准品用样品处理的方法进行处理,然后调节不同的PH,发现在PH=7也就是中性附近的时候可以检测出来,和加标浓度几乎相近,也就是说回收率达到100%,但是将样品调节至PH=7还是检测不出来,感觉这个样品处理方法不是有很大的问题,因为有很多文献支持,但是如果说是样品基质的干扰,之前用鲈鱼做预实验的时候确实检测出来了,我准备再去做一下鲈鱼样品
18楼2014-08-30 14:25:24
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幸福的柴门

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
朱珍(zybpxy代发): 金币+5, 欢迎继续关注此贴,问题解决后请点右下角通知版主处理,我们将发给悬赏金币,并给与一定鼓励 2014-08-29 21:13:35
朱珍: 金币+5, 谢谢您的回答 2014-08-29 21:36:23
标品的基质是比较简单的,而样品基质就复杂了,有漂移可以理解,楼主如果不放心,可以做一个液质联用,鉴定下11分钟的峰是否是你样品峰。祝好。
2楼2014-08-28 15:53:03
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
朱珍: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢~ 2014-08-29 21:36:04
一般遇到这种情况我们都会直接打一级质谱或者二级质谱,以进一步确定加标样品和你的标品相同。还有会不会是你11.7分钟的时候出现了重叠峰干扰了,你的判断!~~~~~
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
3楼2014-08-28 23:39:04
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朱珍

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 幸福的柴门 at 2014-08-28 15:53:03
标品的基质是比较简单的,而样品基质就复杂了,有漂移可以理解,楼主如果不放心,可以做一个液质联用,鉴定下11分钟的峰是否是你样品峰。祝好。

可能这样的成本比较高,我往加标样品中再加入标准品,1:1的比例,结果还是11.7左右出峰,这样能不能解释样品基质其实对标准品是没有干扰的?
4楼2014-08-29 08:30:30
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