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53030102

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
梯度洗脱每一针走完进下一针之前要回到初始状态平衡平衡5分钟
心行之间
11楼2014-08-28 09:59:46
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xiuyuli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意11楼意见。梯度进样后系统未复原所致,解决方案:增加再次进针前的预平衡时间。
12楼2014-08-28 10:56:59
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sun19821217

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的过滤头多长时间没清洗了?有可能是过滤头堵塞导致流动相混合比例不平衡~~~
13楼2014-08-28 12:01:44
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jixfeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guoguo306: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-08-30 10:10:46
guoguo306: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2014-08-30 10:12:36
以前用的一直正常? 那是的柱子不是Agilent SB 的吧?
同意是你的色谱柱效降低所致。6.5%的乙腈,酸性体系SB 柱子耐受根本不行。
曾经走一个拉氧头孢钠 乙酸胺体系(pH 差不多也在4左),5%乙腈梯度体系,也是没几针就这样。

有机相多冲冲,10%-50%-90%-50%-10%-样品流动相,估计就前几针会是正态的峰形。

色谱体系不当,建议换一个其他品牌的C18柱
不要寻找借口
14楼2014-08-28 14:29:37
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小万撸啊撸

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
乙腈的起始比例有点低!导致你的色谱柱柱效降低 了!
15楼2014-08-29 10:29:30
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guoguo306

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by jixfeng at 2014-08-28 14:29:37
以前用的一直正常? 那是的柱子不是Agilent SB 的吧?
同意是你的色谱柱效降低所致。6.5%的乙腈,酸性体系SB 柱子耐受根本不行。
曾经走一个拉氧头孢钠 乙酸胺体系(pH 差不多也在4左),5%乙腈梯度体系,也是没几 ...

柱子是agilent SB柱,谢谢你的回答我很受益。
我采取了以下步骤,最终回复了原来的峰型:
1.首先是冲洗柱子,20%乙腈/纯水,40min;20min梯度;100%乙腈40min。
2.对仪器流路进行清洗,依次纯水,5%硝酸溶液(500ml),纯水,甲醇
16楼2014-08-30 10:10:26
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