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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 十分诡异的电泳问题，困扰太久了，求各位帮忙
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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)

[求助] 十分诡异的电泳问题，困扰太久了，求各位帮忙 已有8人参与

虫子我做DNA电泳接近4年了，从来没失过手，大家可能会想这是一个很简单的实验，怎么会有问题呢？我也是这么想的。所以我师妹出了问题后，我以为很简单就能解决，谁料我亲自上阵，搞了好久问题依旧。真是一世英名毁于这个入门实验手上，晚节不保啊！这不想起了小木虫，特来求助。

言归正传：问题：见图片，不管怎么跑，MARKER都是这个鬼样子，一开始还只有低于500BP的marker出现这样的情况，后面越来越严重，所有的都这样了。

那么问题很简单，我当然不会简单的就来求助，我尝试过哪些解决办法呢？

    一，换电泳Buffer。对师妹不放心，亲自配置新鲜的Buffer，问题依旧。
    二，新买Marker。 这换了Buffer没用，难道Mraker太久了，出问题了？买了俩支新Mraker，一支takara的，一支fermentas的。问题依旧。
    三，新买琼脂糖。 没办法，怀疑琼脂糖有问题，新买了一瓶BIOWEST的琼脂糖。问题依旧。
    四，新买染料。 我们实验室用的是Biotum的gelred，买了大概有大半年了，怀疑染料出了问题，买一支新的。问题依旧。
    五，换电泳仪。 难道电泳仪老化，电压不稳？换另一个一直在跑蛋白偶尔也跑跑中性PAGE的电泳仪（一直正常运行）。问题依旧。
   
神啊，都换得差不多了，还是老样子，这可如何是好？  难道是我加热的姿势不对？微波炉加热和电磁炉加热会有区别吗？明天试试。

十分诡异的电泳问题，困扰太久了，求各位帮忙
20140825.jpg
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1楼 2014-08-26 20:10:27
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by 阿修罗Axuro at 2014-08-26 20:11:22
我没有火气大，是看你回答问题如此马虎，marker严重超标会很亮，你看我的marker的亮度就应该知道没有严重超标。marker我按说明书上的5ul...

下次，也许是今天，再跑的时候用1ul或更少试试看。
或者专门跑个marker，取5 ul稀释至50ul，然后一次上样10、5、2.5、1ul，然后把照片发上来看看。

亮是一回事，难道你没看到你的bands都很胖吗？都突到两侧了，这不是超量是什么？
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22楼2014-08-27 09:24:02
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独身行天下

金虫 (小有名气)
会不会是琼脂糖浓度问题？

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-08-26 20:26:35
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莫伊2013

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
阿修罗Axuro(youlinglyw代发): 金币+5, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-28 17:41:28
是不是水被污染了，配BUFFER的水被污染，或者装BUFFER的瓶子被污染了
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3楼2014-08-26 20:28:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 莫伊2013 at 2014-08-26 20:28:35
是不是水被污染了，配BUFFER的水被污染，或者装BUFFER的瓶子被污染了

我新配Buffer的时候，全是新换的。而且后面又继续新配了几批Buffer，也是一样的问题。
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4楼2014-08-26 20:38:39
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