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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » HPLC检测时怎么数据隔天做的没办法做到重复性
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mingmeichen

铜虫 (初入文坛)

[交流] HPLC检测时怎么数据隔天做的没办法做到重复性

如题目,请高手指点,存在哪些可能性
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1楼 2008-04-15 09:58:33
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哇蛤哈

金虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):谢谢应助，请继续关注……^_^
影响重复性的原因有：温度，流动相是否同一批。。。。。
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2楼2008-04-15 10:34:01
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xfd

金虫 (正式写手)

HPLC检测时怎么数据隔天做的没办法做到重复性

★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢应助，请继续关注……^_^
你说的重现性具体指峰位置还是含量，还是两者都是。有不明确的地方。
当然重现性好坏与许多因素有关，如色谱柱的性能、泵压是否波动、还有样品本身、以及色谱检测条件，如柱温、流动相配比等有关系。
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3楼2008-04-15 10:47:54
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mingmeichen

铜虫 (初入文坛)
是指含量问题,流动相是纯甲醇,没变过,流速也没变过.没有应用柱温箱.不过我做实验的时候没有每天接着做,柱子还是借的,所以如上所说的色谱柱的性能有所变化吧.泵压倒是挺稳定的.不过样品溶液是在不断配的,所以样品可能也有点问题吧 .另外却想不到问题可能出现在哪里了
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4楼2008-04-15 11:09:53
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evilzhou

金虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):thanks~~
首先你的方法重现性有没有考察过?连续做样重现性怎么样？
其次你的柱子性能如何？每次做完试验有没有冲洗柱子，保证柱效？
然后是流动相的配制方法是不是一样？
例如1：1的甲醇水，你量50mL的甲醇用水定容至100mL  、量50mL水用甲醇定容到100mL以及量50mL水 50mL甲醇混溶，这样作出来的结果都是不同的
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5楼2008-04-15 11:55:34
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Alice130

金虫 (正式写手)
dnp(金币+0,VIP+0):你好，请下次登陆的时候要用同一ID登陆，现在你和楼主的IP是一致并且看情形可能是同一人，因此，为了不引起不必要的麻烦，建议你还是用同一ID登陆……^_^
同一天做出来的重现性都非常好，但是隔几天做就会出现保留时间改变的情况

我们用的是纯甲醇做流动相，所以不会出现楼上说的配置方法方面的问题

还有，同一个样品，不同浓度情况下，难道保留时间会改变？怎么我们的浓度变大了，保留时间缺有变小的趋势？？真是想不明白了
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知足常乐，学会感恩，快乐生活
6楼2008-04-15 14:29:01
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Alice130

金虫 (正式写手)
解释一下，发帖的是我师妹，因为她上网不方便，所以让我帮她照看下帖子的，实验是我和她一块做的
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知足常乐，学会感恩，快乐生活
7楼2008-04-15 21:25:16
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elainexue

铁虫 (初入文坛)
同一样品不同浓度，保留时间确实会变化，但是不会变化很大，我自己的样品里好像没有超过1min的（具体没注意），不知道你稀释样品的溶剂是什么，与流动相区别大的话也会有影响。顺便问一下你的流速是多少？
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8楼2008-04-19 20:03:48
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w402870694

看了上面的贴了大多数已经分析到了，顺便问句你出的可分析的峰（5分钟后的峰）不只是一个吧，你参看下只是你要的那峰变了其他峰呢？也都一样的变么
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9楼2008-04-19 20:30:01
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mingmeichen

铜虫 (初入文坛)

回答楼上的问题

楼上说的什么我有点不明白。不过我的样品出峰比较密集，怎么样消除找错峰的可能性呢
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10楼2008-04-20 10:02:12
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