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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 急求关于DNA末端平滑化后鉴定的问题
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jing843

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求关于DNA末端平滑化后鉴定的问题 已有1人参与

我最近在做DNA末端平滑化有关的实验，酶切产物胶回收后进行末端平滑化，怎么进行鉴定末端给平了呐？请高手指点迷津！
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1楼 2014-08-24 15:08:35
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实我很想说，为什么不用高保真的酶呢，PCR产物就直接是平末端的啊！
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2楼2014-08-24 17:03:31
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huyan0817

木虫 (正式写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-24 19:32:50
将末端平化后的产物与原来的酶切不要的部分连接，看连接效率如何！如果连接效率不高甚至不能连接就证明末端平化效果不错。最好设计一对引物，用高保真酶PCR，产物将直接是平化的，不会带A！
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2014-08-24 17:42:24
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kwkw

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by huyan0817 at 2014-08-24 17:42:24
将末端平化后的产物与原来的酶切不要的部分连接，看连接效率如何！如果连接效率不高甚至不能连接就证明末端平化效果不错。最好设计一对引物，用高保真酶PCR，产物将直接是平化的，不会带A！

太聪明了，用高保真酶扩
赞一下 回复此楼
再苦：也别忘记坚持！再烦：也别忘记微笑！再急：也要注意语气！再累：也要爱自己！低调做人，你会一次比一次稳健。高调做事，你会一次比一次优秀！
4楼2016-04-19 14:49:02
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