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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 求助：HPLC（已解决，谢谢大家）
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小连翘

银虫 (小有名气)

[交流] 求助：HPLC（已解决，谢谢大家）

最近做HPLC，分析条件如下：
色谱柱：welchrom ODS  4.6×250mm 5um
流动相：10mMKH2PO4水溶液：H3PO4：甲醇=10：0.05：100
流  速：1.0ml/min
柱温箱：30℃
检测波长：203nm

但是进样后发现直接流动相进样也会出峰，谱图如附件

流动相是人工混合好的，怎么还会有谱峰出现，请各位帮帮忙分析一下了，谢谢！

[ Last edited by 小连翘 on 2008-4-15 at 19:08 ]
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1楼 2008-04-14 14:27:11
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小连翘

银虫 (小有名气)
谢谢大家的帮忙，后来我们发现是进样的时候的问题，我们使用的是一次性的注射器进样，后来换成玻璃进样针，问题就解决了，
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5楼2008-04-15 19:06:04
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查看全部 8 个回答

jjf4085

木虫 (正式写手)
楼主的流动相主要是盐与有机相,按理是不会出峰的,建议楼主重新配流动相,再试一下;再有可能就是没平衡好或这根柱子以前做过别的东西没有冲洗干净,可以先冲一下柱子,重配流动相后小流速平衡一夜,第二天再试一下!
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2楼2008-04-14 16:31:34
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫
引用回帖:
Originally posted by 小连翘 at 2008-4-14 14:27:
最近做HPLC，分析条件如下：
色谱柱：welchrom ODS  4.6×250mm 5um
流动相：10mMKH2PO4水溶液：H3PO4：甲醇=10：0.05：100
流  速：1.0ml/min
柱温箱：30℃
检测波长：203nm

但是进样后发现直接流动 ...

我认为可能是1、流动相污染（包括你用的缓冲盐、酸及有机溶剂） 2、系统不干净 3、色谱柱污染    4、建议把甲醇换成乙腈
  不知楼主做的什么成分，可以试一下蒸发光检测器！
建议楼主要是有液相方面的问题，可以去分析板块，找一下“专题应助之：液相色谱以及液质联用”，那里人较多，专门解决问题！
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是也罢，非也罢，是是非非争个啥。河东河西三十年，对的错啦，错的对拉！得也罢，失也罢，患得患失误年华。凡事该做尽管做，得了更好，失也没啥！
3楼2008-04-14 16:33:25
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哇蛤哈

金虫 (小有名气)
楼主用的波长为203nm属于低波长，低波长下流动相也很容易出峰，这种现象很正常，见怪不怪！~^_^~
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4楼2008-04-14 16:55:52
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