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小-丑鱼捐助贵宾 (正式写手)
对我而言可爱的她
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[交流]
为什么实验时用到ROX，而在分析时却取消ROX选择NONE
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无论是否选择ROX做为passive reference,在component的分析模式下FAM和VIC都有扩增的曲线，而且在选择ROX的情况下，显示的是一条为0的直线，但是在amplification plot的模式下，选择了ROX就变成什么信号也没有了，取消ROX就FAM和VIC就正常了。 这是为什么呢？ 有人探索了一下，发现扩增曲线校正公式---“检测荧光值除以参比荧光值”，如果参比荧光值为0，则校正荧光值（Rn）为0。那么他说可能就是这个原因，ROX荧光值为0，根据计算后Rn也为0，没有扩增曲线，如果取消ROX参比荧光后，则component的曲线坐标和amplification plot的曲线坐标是一样的，则会显示出实际的扩增曲线。 还有人说，校正荧光ROX的强度比较高，当你样品的荧光强度较低时，会被ROX的荧光所掩饰，就是说你的目的荧光强度还没有试剂盒本身校正荧光的强度高，所以你的曲线看起来是平的或者甚至是负的；当把ROX屏蔽以后，曲线就变为正常的曲线。 我就比较疑惑了，有没有比较权威的解释，实在不明白，请大家多多指教，谢谢！ |
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