应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 提取的草莓叶片DNA呈粘稠状，为什么？影响PCR结果吗？谢谢！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 782  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

seahzau

金虫 (小有名气)

[交流] 提取的草莓叶片DNA呈粘稠状，为什么？影响PCR结果吗？谢谢！

最近小量法提取了转基因草莓叶片DNA进行PCR鉴定，发现DNA溶解后呈粘稠状，用枪都不易吸取来，请问是什么原因啊？因为含糖量过高吗？怎么解决啊？
但电泳检测，DNA带很明显，这种质量的DNA影响PCR鉴定结果吗？我共鉴定了70个转基因的草莓样品，都没有得到阳性的转基因植株，是DNA的问题还是确实外源基因没有转进去呢？急需各位高手帮忙，非常感谢！！！！
[search]草莓[/search]
回复此楼

» 猜你喜欢
一不留神就容易迷失！
1楼 2008-04-13 21:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyur

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):积极交流奖
三楼的说得不错
y样品太多也不好
0.1到0.3g就可以
第二步可以找两个样剧烈震荡30秒比较一下
第四步加入十分之一上清液体积的醋酸钠（PH5.2）
最后DNA定容100ul～200ul溶解
你可以同时尝试不同的方面比较一下
赞一下(10人) 回复此楼
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
8楼2008-04-14 17:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

xiaoyur

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
很可能是多糖含量太多了
多糖太多影响rTaq酶的活性，有几个方法改进
1  在提取DNA时，提取缓冲中加无水乙醇至终浓度20％，可以降低多糖，但DNA含量会有所减少哦，不过做PCR是足够用了。
2  提取缓冲液加入PVP也可以降低多糖
3，如果提出来的DNA较多，DNA样品稀释5～50倍之后再做PCR
一定要加阳性质粒和清水对照，有内参基因更好，
祝你好运◎◎◎◎◎◎◎

[ Last edited by xiaoyur on 2008-4-13 at 22:52 ]
赞一下(10人) 回复此楼
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
2楼2008-04-13 22:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiafeixn

木虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
把你提取的方法最好简要介绍一下，有可能是你鲜样太多；如果是采用离心的方法收集DNA的话，也可以考虑改为挑起核酸沉淀，用1～2mL冲洗液（75%乙醇,10mM乙酸铵）冲洗，室温下晾干
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-04-14 02:02:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinying

木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
降低多糖的方法很多,醋酸钠效果很好啊,使用材料也是应该考虑的问题
用新鲜叶片,使用老叶片百分之百提不出.
至于转米转进去基因,你现在DNA提取状态来看,还很难说啊
赞一下(10人) 回复此楼
云在天边，水在瓶。
4楼2008-04-14 10:55:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-28 4/200 2026-03-29 00:32 by 544594351
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[考研] 求调剂 +8 张zz111 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:41 by fmesaito
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。，。，。，。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭