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DEAE分离纯化糖苷酶相关 已有1人参与
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最近尝试对想要得到的糖苷酶进行分离纯化 菌液离心得到粗酶液,直接用硫酸铵进行30-80梯度沉淀,得到的蛋白经透析后转化人参皂苷A,转化得到的最主要产物是人参皂苷B; 但是经过DEAE-纤维素梯度层析后,所得到的每个组分经硫酸铵沉淀后都不能转化人参皂苷A到B,而是转化出了另一种人参皂苷,洗脱液为含0,0.25,0.5,0.75,1M的NaCl的NaAc-HAc溶液。 重复过N次,结果都一样,请问到底是哪一步出了问题呢??? |
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mengyu615
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