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酷恋花

木虫 (正式写手)

[求助] 请教高人:用于蛋白样品分析的原子力探针有什么要求? 已有1人参与

是不是只要力常数低至零点几就可以了呢?还有别的什么需要注意的吗?一直想用原子力对我的蛋白样品成像,可是一直没做出来。想试试液态成像····感激不尽。
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dustpuppet

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
酷恋花: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 感谢热心回复~忘了给评分了~ 2014-08-15 22:00:55
蛋白本身尺寸很小, 就算是streptavidin这种大蛋白,如果不凝聚,也就1-2纳米。 如果你想用AFM看单个蛋白的结构,比较难。 针尖直径都有6nm了。 除非你看蛋白聚合物还可以。 水溶液中的蛋白结构可以做,但是最好先想办法把蛋白固定基地上。 常用的方法就是云母+APTES+戊二醛。 通过戊二醛来交联蛋白固定。这个是手艺活
我只谈技术
2楼2014-08-15 11:10:26
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酷恋花

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dustpuppet at 2014-08-15 11:10:26
蛋白本身尺寸很小, 就算是streptavidin这种大蛋白,如果不凝聚,也就1-2纳米。 如果你想用AFM看单个蛋白的结构,比较难。 针尖直径都有6nm了。 除非你看蛋白聚合物还可以。 水溶液中的蛋白结构可以做,但是最好先想 ...

首先感谢您的应助。我看的是微丝,单根的直径有7纳米,束状的有几十上百纳米呢~我看有的文献里就直接让微丝吸附在云母上,自然干燥,然后就直接用接触模式扫了了~给的图片也挺清晰的~为啥我扫不出来呢……郁闷呐……

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3楼2014-08-15 14:40:15
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dustpuppet

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 酷恋花 at 2014-08-15 14:40:15
首先感谢您的应助。我看的是微丝,单根的直径有7纳米,束状的有几十上百纳米呢~我看有的文献里就直接让微丝吸附在云母上,自然干燥,然后就直接用接触模式扫了了~给的图片也挺清晰的~为啥我扫不出来呢……郁闷呐 ...

如果你的微丝是带负电的,那就不用指望他能自然的吸附到云母,直接排斥就走了。 文献很多细节是不透露的,你按照那些文祥的方法,十有八九都做不出来。 慢慢你就懂了。 如果你的微丝的类型跟文献里面一样,那么根据我的经验,你可以考虑一下溶液的pH值调节,还有就是干燥的湿度。 另外,如果你是自然干燥,那么很可能他们就会团聚在最后干燥的那个中心小区域,其他地方是完全什么都没有的。我从来就不用自然干燥的方法,因为表面会有大量溶液物质残留,扫出来都不知道是什么东西,万一被撤稿,这辈子都不用混了
我只谈技术
4楼2014-08-16 14:57:22
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酷恋花

木虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by dustpuppet at 2014-08-16 14:57:22
如果你的微丝是带负电的,那就不用指望他能自然的吸附到云母,直接排斥就走了。 文献很多细节是不透露的,你按照那些文祥的方法,十有八九都做不出来。 慢慢你就懂了。 如果你的微丝的类型跟文献里面一样,那么根据 ...

不用自然干燥?那看来就只有用氩气或者氮气啥的吹干了呗?可是这样就不会有溶液物质残留了吗?我昨天的样品的确看上去很脏,不知道是盐结晶还是别的什么杂质~想不到我的二次水也不过如此~

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5楼2014-08-16 17:39:43
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dustpuppet

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 酷恋花 at 2014-08-16 17:39:43
不用自然干燥?那看来就只有用氩气或者氮气啥的吹干了呗?可是这样就不会有溶液物质残留了吗?我昨天的样品的确看上去很脏,不知道是盐结晶还是别的什么杂质~想不到我的二次水也不过如此~
...

要用纯净水轻柔的清洗,洗去过多的盐离子,然后氮气吹干就好,不用氩气吧。好奢侈

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我只谈技术
6楼2014-08-17 00:15:12
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酷恋花

木虫 (正式写手)

送红花一朵
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6楼: Originally posted by dustpuppet at 2014-08-17 00:15:12
要用纯净水轻柔的清洗,洗去过多的盐离子,然后氮气吹干就好,不用氩气吧。好奢侈...

谢谢您的提示~我今天就去试试看~实验室的纯水仪得到的水应该能满足要求~可能还是我的盐除得不够彻底~

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7楼2014-08-17 08:55:41
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vgiant1988

金虫 (正式写手)

你看一下文献,扫描生物样品用的都是很软的探针,就是力常数比较小的探针,比如0.06N/m,还有更小的0.01的
生物技术、纳米技术两大忽悠人的技术我都占了
8楼2014-11-12 11:21:59
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酷恋花

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by vgiant1988 at 2014-11-12 11:21:59
你看一下文献,扫描生物样品用的都是很软的探针,就是力常数比较小的探针,比如0.06N/m,还有更小的0.01的

0.1以下的基本只能做接触模式了~我想做轻敲~前辈能不能给个建议~

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9楼2014-11-12 12:02:43
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