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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 二倍稀释法测量化合物MIC值问题？
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pzy朵朵

金虫 (初入文坛)

[求助] 二倍稀释法测量化合物MIC值问题？ 已有2人参与

我用二倍稀释法测量一些化合物的MIC值实验。

实验菌预先用培养皿培养了一次，并做完计数。
二倍稀释法用的是LB培养基。
结果发现：变形杆菌和藤黄微球菌培养后所有板都不生长，而产气、枯草可以生长。
分析实验结果，觉得是不是培养基的问题，查了文献发现有用MH培养基和营养肉汤(NB)的。
不知道这些不同的培养基区别是什么，该如何选择。二倍稀释法对培养基的要求高吗？一般使用的是什么培养基？
另外：二倍稀释法对细菌的浓度要求高么？

谢谢！
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1楼 2014-08-12 17:05:21
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pzy朵朵

金虫 (初入文坛)
没人回到啊，自己顶一下。请高手们指点下。
查了文献说，可以按照美国标准做，也查不到具体是哪个标准。
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2楼2014-08-14 09:06:23
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xiaoq_tiansh

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pzy朵朵: 金币+40, ★★★很有帮助 2014-08-14 17:11:29
1、可能是菌的活力不够，可以把菌多活化几次再试试。
2、如果可以也可以先做一下生长曲线，找到菌的对数生长期，然后每次试验的时候，活化两次，在第二次活化进入对数生长期的时候开始试验，整个流程固定下来以后，就每次试验都按这个方法操作，可以算作标准的操作。
3、培养基的问题不是很大，一般的基础培养基都可以。
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3楼2014-08-14 10:12:43
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若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pzy朵朵: 金币+40, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-08-14 17:11:39
用MH培养基和营养肉汤(NB)应该差别不大，菌要选择对数生长期的菌液，浓度在10的6次方左右，另外针对你的实验结果，也是有可能的，不同的菌株对同一种抗生素的敏感性是不同的，可以把变形杆菌和藤黄微球菌所在平板的抗生素浓度再往下做几个稀释度试一试
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
4楼2014-08-14 11:47:47
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pzy朵朵

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoq_tiansh at 2014-08-14 10:12:43
1、可能是菌的活力不够，可以把菌多活化几次再试试。
2、如果可以也可以先做一下生长曲线，找到菌的对数生长期，然后每次试验的时候，活化两次，在第二次活化进入对数生长期的时候开始试验，整个流程固定下来以后， ...

嗯，谢谢指点。
下次实验试试，看看是否是菌的活力不够。
空白菌液对照都没有长菌。
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5楼2014-08-14 17:09:07
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pzy朵朵

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 若溪 at 2014-08-14 11:47:47
用MH培养基和营养肉汤(NB)应该差别不大，菌要选择对数生长期的菌液，浓度在10的6次方左右，另外针对你的实验结果，也是有可能的，不同的菌株对同一种抗生素的敏感性是不同的，可以把变形杆菌和藤黄微球菌所在平板的 ...

我的空白菌对照都没有长菌，不是抗生素活性太大导致的。

那可能是菌的活性不够了。我这次用的是LB培养基，下次换用MH培养基试试了，
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6楼2014-08-14 17:11:15
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若溪

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by pzy朵朵 at 2014-08-14 17:11:15
我的空白菌对照都没有长菌，不是抗生素活性太大导致的。

那可能是菌的活性不够了。我这次用的是LB培养基，下次换用MH培养基试试了，...

我的空白菌对照都没有长菌？是什么意思？没有加抗生素的培养基接菌也没长吗？
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
7楼2014-08-15 07:47:29
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pzy朵朵

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 若溪 at 2014-08-15 07:47:29
我的空白菌对照都没有长菌？是什么意思？没有加抗生素的培养基接菌也没长吗？...

嗯，就是的，就是什么都没加的含菌培养基没有长菌。
所以才怀疑是不是培养基选的不对。
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8楼2014-08-15 08:47:08
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若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by pzy朵朵 at 2014-08-15 08:47:08
嗯，就是的，就是什么都没加的含菌培养基没有长菌。
所以才怀疑是不是培养基选的不对。...

恩，那就试试别的培养基，原理上讲不加抗生素的空白对照管菌是应该正常生长的
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
9楼2014-08-15 16:40:25
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yanmomoha

新虫 (初入文坛)
您好，我想问下您 那个MIC是直接用肉眼观察哪个是澄清的哪个就是MIC ? 还是说用分光光度计测,然后和空白比较？
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10楼2014-11-11 15:22:39
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