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skkyy88888铜虫 (著名写手)
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[交流]
RNA提取前期准备
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| 大家好，提取ＲＮＡ的前期详细准备谁有？分享下．谢谢 |
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5楼2008-04-20 15:12:49
2楼2008-04-11 10:23:13
guozhongbaono1
木虫 (正式写手)
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- 专业: 水产生物遗传育种学
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lixiaoyi1981(金币+5,VIP+0):呵呵，非常详细，谢谢
lixiaoyi1981(金币+5,VIP+0):呵呵，非常详细，谢谢
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RNA 抽提 一，准备工作 1， 实验器具与材料： （1） 移液枪：1ml、200ul、10ul （2） 吸头：1ml、200ul、20ul （3） 吸头台：放置 1ml 吸头的一个，放置 200ul 和20ul 的吸头一个 （4） EP管 1.5ml、100ul （5） 玻璃研磨器 、研钵、电匀浆器等 （6） 容量瓶：1000ml （7） 盐水瓶：100ml （8） 15ml 塑料管一个（配 75％乙醇用） 2， 实验器具的处理与准备 （1） 塑料制品：（包括吸头、EP管等） 将塑料制品逐个浸泡于 1‰DEPC 水中（必要时小枪头需要用吸管打入 DEPC 水）37℃过夜，然后送至高压 3 次，后在 80℃烘烤箱中烘干（或置于 37℃中 8 小时左右烘干），试验前将枪头放入吸头台。 （2） 玻璃制品： （主要是玻璃研磨器） 先泡酸过夜，冲洗干净后，在 1‰DEPC 水中泡8 小时左右，37℃烘干，用蒙锡 纸包裹送至干烤 3 次。 （3） 金属制品：（镊子等） 先洗干净，再送干烤 3次。（不需要泡 DEPC 水） 3， 试剂配制和准备： （1） DEPC 水：泡实验器具的 DEPC 水的配制：1000ml 双蒸水中加 1mlDEPC，放在1000ml 容量瓶中静置 4 小时后备用。配 75％乙醇的 DEPC 水的配制：100ml 盐水瓶内装 40ml 双蒸水，加 40ulDEPC，37℃过夜，送至高压。 （2） 75％乙醇（要在抽提时现配）：用无水乙醇和 DEPC 水配制（DEPC 水:无水乙醇＝1:3），然后放于-20℃备用。 （3） 异丙醇：放入棕色瓶 （4） 氯仿：放入棕色瓶 （5） Trizol：100ml/瓶 存放于4℃ 二，抽提时注意事项： 全程佩戴一次性手套和口罩，手套要勤换，避免戴上的一次性的手套接触可疑污染物。 呵呵 就这么多吧！要是有别的话，大家一起探讨吧！ RNA不是很好提的，预祝实验成功！！！ |
3楼2008-04-11 15:21:31
skkyy88888
铜虫 (著名写手)
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4楼2008-04-20 15:04:52
