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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] RNA提取前期准备

大家好,提取RNA的前期详细准备谁有?分享下.谢谢
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

不在超净台里工作可以吗?影响大吗?
4楼2008-04-20 15:04:52
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weiwei1

木虫 (小有名气)

DEPC处理枪头,EP管,水。其他试剂要专用。提取时,戴口罩、帽子、手套,在专门的位置进行提取,尽量不要说话。
2楼2008-04-11 10:23:13
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guozhongbaono1

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
lixiaoyi1981(金币+5,VIP+0):呵呵,非常详细,谢谢
RNA 抽提
一,准备工作
1, 实验器具与材料:
(1)  移液枪:1ml、200ul、10ul
(2)  吸头:1ml、200ul、20ul
(3)  吸头台:放置 1ml 吸头的一个,放置 200ul 和20ul 的吸头一个
(4)  EP管 1.5ml、100ul
(5)  玻璃研磨器 、研钵、电匀浆器等
(6)  容量瓶:1000ml
(7)  盐水瓶:100ml
(8)  15ml 塑料管一个(配 75%乙醇用)
2, 实验器具的处理与准备
(1)  塑料制品:(包括吸头、EP管等)
将塑料制品逐个浸泡于 1‰DEPC 水中(必要时小枪头需要用吸管打入 DEPC
水)37℃过夜,然后送至高压 3 次,后在 80℃烘烤箱中烘干(或置于 37℃中 8
小时左右烘干),试验前将枪头放入吸头台。
(2)  玻璃制品: (主要是玻璃研磨器)
先泡酸过夜,冲洗干净后,在 1‰DEPC 水中泡8 小时左右,37℃烘干,用蒙锡
纸包裹送至干烤 3 次。
(3)  金属制品:(镊子等)
先洗干净,再送干烤 3次。(不需要泡 DEPC 水)
3, 试剂配制和准备:
(1)  DEPC 水:泡实验器具的 DEPC 水的配制:1000ml 双蒸水中加 1mlDEPC,放在1000ml 容量瓶中静置 4 小时后备用。配 75%乙醇的 DEPC 水的配制:100ml
盐水瓶内装 40ml 双蒸水,加 40ulDEPC,37℃过夜,送至高压。
(2)  75%乙醇(要在抽提时现配):用无水乙醇和 DEPC 水配制(DEPC 水:无水乙醇=1:3),然后放于-20℃备用。
(3)  异丙醇:放入棕色瓶
(4)  氯仿:放入棕色瓶
(5)  Trizol:100ml/瓶  存放于4℃
二,抽提时注意事项:
全程佩戴一次性手套和口罩,手套要勤换,避免戴上的一次性的手套接触可疑污染物。  


呵呵 就这么多吧!要是有别的话,大家一起探讨吧!
RNA不是很好提的,预祝实验成功!!!
快乐是一天,不快乐也是一天,为何不天天快乐昵~~~
3楼2008-04-11 15:21:31
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tudou3336

铜虫 (初入文坛)

guozhongbaono1    说的挺详细的!
5楼2008-04-20 15:12:49
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