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skkyy88888铜虫 (著名写手)
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RNA提取前期准备
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| 大家好,提取RNA的前期详细准备谁有?分享下.谢谢 |
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guozhongbaono1
木虫 (正式写手)
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lixiaoyi1981(金币+5,VIP+0):呵呵,非常详细,谢谢
lixiaoyi1981(金币+5,VIP+0):呵呵,非常详细,谢谢
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RNA 抽提 一,准备工作 1, 实验器具与材料: (1) 移液枪:1ml、200ul、10ul (2) 吸头:1ml、200ul、20ul (3) 吸头台:放置 1ml 吸头的一个,放置 200ul 和20ul 的吸头一个 (4) EP管 1.5ml、100ul (5) 玻璃研磨器 、研钵、电匀浆器等 (6) 容量瓶:1000ml (7) 盐水瓶:100ml (8) 15ml 塑料管一个(配 75%乙醇用) 2, 实验器具的处理与准备 (1) 塑料制品:(包括吸头、EP管等) 将塑料制品逐个浸泡于 1‰DEPC 水中(必要时小枪头需要用吸管打入 DEPC 水)37℃过夜,然后送至高压 3 次,后在 80℃烘烤箱中烘干(或置于 37℃中 8 小时左右烘干),试验前将枪头放入吸头台。 (2) 玻璃制品: (主要是玻璃研磨器) 先泡酸过夜,冲洗干净后,在 1‰DEPC 水中泡8 小时左右,37℃烘干,用蒙锡 纸包裹送至干烤 3 次。 (3) 金属制品:(镊子等) 先洗干净,再送干烤 3次。(不需要泡 DEPC 水) 3, 试剂配制和准备: (1) DEPC 水:泡实验器具的 DEPC 水的配制:1000ml 双蒸水中加 1mlDEPC,放在1000ml 容量瓶中静置 4 小时后备用。配 75%乙醇的 DEPC 水的配制:100ml 盐水瓶内装 40ml 双蒸水,加 40ulDEPC,37℃过夜,送至高压。 (2) 75%乙醇(要在抽提时现配):用无水乙醇和 DEPC 水配制(DEPC 水:无水乙醇=1:3),然后放于-20℃备用。 (3) 异丙醇:放入棕色瓶 (4) 氯仿:放入棕色瓶 (5) Trizol:100ml/瓶 存放于4℃ 二,抽提时注意事项: 全程佩戴一次性手套和口罩,手套要勤换,避免戴上的一次性的手套接触可疑污染物。 呵呵 就这么多吧!要是有别的话,大家一起探讨吧! RNA不是很好提的,预祝实验成功!!! |

3楼2008-04-11 15:21:31
2楼2008-04-11 10:23:13
skkyy88888
铜虫 (著名写手)
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4楼2008-04-20 15:04:52
5楼2008-04-20 15:12:49













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