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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lddd85

[交流] 求助 出峰时间

用乙腈-0.1%磷酸做流动相,可是调整乙腈比例之后,不管是调大还是调小,出峰时间都比原来要晚,结果不应该是这样的啊,到底怎么回事??
请大家帮忙找找原因!!!!
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ambitionhero

木虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢您的指教!
我在做大黄素的含量的时候,也遇到这样的问题,流动相跟楼主也是一样的,一般情况20分钟就出峰了,那次40分钟才出来,而且峰特别宽,柱效上不去。

可能原因分析如下:
C18柱起保留作用的位置就是硅羟基,由于流动相偏酸性,致使柱键合相硅羟基增多,柱保留时间延长,但硅羟基增多且不均匀,就会使柱效降低,影响测量样品的准确性。
建议:用水1ml流速冲洗柱30分钟,然后甲醇冲洗1-2小时,第二天再做。如果不行,建议用pH为7-8.5的磷酸盐缓冲液冲洗 后,再用水洗,再换磷酸和乙腈的流动相走,走平后进样,看是否有效。
我是采用的前一种方法,有效。
8楼2008-04-11 21:43:46
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chenhanzongzhe

新虫 (初入文坛)

是否比例阀出了问题
2楼2008-04-11 09:05:08
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
不可能啊!分析原因:1、流动相是否正确,酸的浓度、有机相比例。2、机器原因可能性较小。3、色谱柱原因。4、样品原因
是也罢,非也罢,是是非非争个啥。河东河西三十年,对的错啦,错的对拉!得也罢,失也罢,患得患失误年华。凡事该做尽管做,得了更好,失也没啥!
3楼2008-04-11 09:21:57
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jzz8035

木虫 (著名写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢!
你要搞清楚调整流动相时柱压有否变化,如果有变化证明机器是好的,只能从色谱柱考虑。
4楼2008-04-11 09:36:09
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