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求助 出峰时间
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用乙腈-0.1%磷酸做流动相，可是调整乙腈比例之后，不管是调大还是调小，出峰时间都比原来要晚，结果不应该是这样的啊，到底怎么回事？？ 请大家帮忙找找原因！！！！ |
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2楼2008-04-11 09:05:08
xy4585618
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3楼2008-04-11 09:21:57
jzz8035
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4楼2008-04-11 09:36:09
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ambitionhero
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢您的指教！
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我在做大黄素的含量的时候，也遇到这样的问题，流动相跟楼主也是一样的，一般情况20分钟就出峰了，那次40分钟才出来,而且峰特别宽，柱效上不去。 可能原因分析如下： C18柱起保留作用的位置就是硅羟基，由于流动相偏酸性，致使柱键合相硅羟基增多，柱保留时间延长，但硅羟基增多且不均匀，就会使柱效降低，影响测量样品的准确性。 建议：用水1ml流速冲洗柱30分钟，然后甲醇冲洗1-2小时，第二天再做。如果不行，建议用pH为7-8.5的磷酸盐缓冲液冲洗 后，再用水洗，再换磷酸和乙腈的流动相走，走平后进样，看是否有效。 我是采用的前一种方法，有效。 |
8楼2008-04-11 21:43:46
li-hs454
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