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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 溶解曲线不好荧光定量pcr的数据就用不了吗？
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songzuowei
引用回帖:
10楼: Originally posted by 梦梦神 at 2014-08-14 15:08:37
好的 问题解决中 以后多多交流请多指教...

11楼2014-08-14 16:38:27
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yangxy04

金虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-20 16:57:27
溶解曲线显示有非特异性扩增，由于SYBRGREEN法的特点，引物二聚体和非特异扩增的结果都会导致Ct值不可信。
建议题主不愿意更换引物可以从以下几点进行优化：
1、降低反应体系中的引物浓度。
2、采用三步法进行反应。
3、可以考虑更换PCR mix试试。
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12楼2014-08-20 16:28:51
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龙影星痕1990

新虫 (初入文坛)
你的溶解曲线表明可能出现非特异性扩增了，建议你只加引物跑一下定量，看是不是引物二聚体的问题。
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13楼2015-05-07 21:42:01
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GJT0427gjt

新虫 (初入文坛)
溶解曲线有杂峰，这个数据是不建议采用的。
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14楼2015-09-12 20:12:01
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