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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取
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songzuowei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhuangkai520 at 2014-08-05 17:10:12
额，要不我在试试？？？多加点染料，
要不我都怀疑里面都是些什么！！...

如果真是2ug/ul没错的话 酶切是绝对没问题的 如果你的胶或者拍胶的机器没问题的话 那就是你测浓度没测好 质粒没抽好 得从新抽 基本没有其它可能
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11楼2014-08-06 08:38:15
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songzuowei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-08-05 22:58:39
人家是Elution Buffer啦~
...

惭愧啊
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12楼2014-08-06 08:38:53
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alicelchf

木虫 (著名写手)
不影响 要不，你再苯酚氯仿重提一下 浓缩浓缩 呵呵
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修身、齐家、治国、平天下
13楼2014-08-06 13:33:27
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雪夜星辰12

木虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 09:26:28
乙醇洗过后，要室温放置10~15 min，时间太长容易引起DNA脱水，从而导致不易溶解，时间太短乙醇残留对质粒抽提有关系。
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14楼2014-08-06 16:29:16
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-字仲康

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
15楼2014-08-07 21:35:38
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-字仲康

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励回帖交流 2014-08-08 09:28:15
本帖内容被屏蔽
16楼2014-08-07 21:44:03
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zhuangkai520

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by -字仲康 at 2014-08-07 21:44:03
不是很亮的原因有多种的  用不同的额试剂盒提取质粒是会有不同的效果的 亮度和条带的单一性也会有所不同  再有就是菌体的浓度太低 也会影响到质粒的亮度
当觉得质粒亮度不够的时候  可以在酶切的时候加大加入质粒 ...

那酶切时间是多长呢？还有酶的量？
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深圳的东北人
17楼2014-08-08 11:35:32
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ncuduhan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by songzuowei at 2014-08-05 16:39:25
“最后EB溶解DNA的”，大哥，你不要吓我啊，是TE吧，2ug/ul浓度很可以了，酶切绝对没问题啊

是elution buffer ~试剂盒里面的！
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18楼2014-08-08 12:15:14
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clark2010

金虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 09:26:40
亮不亮，你得和Marker作比较，最好是有个图。另外不亮的话可能是溴化乙锭浓度不够了，可以加点溴化乙锭或者延长染胶时间。
你的DNA浓度那么高，如果质粒亮度低的话，理论上来说，剩下的就是染色体DNA了，那跑胶的时候染色体DNA应该会很亮的
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19楼2014-09-08 23:57:12
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