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zhuangkai520

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取 已有2人参与

碱裂法提取质粒,10ml菌液,中间使用酚氯仿异戊醇抽提,异丙醇沉淀,70%乙醇洗涤,最后EB溶解DNA的,Nanopdrop1000 质粒浓度在2000ng/ul  跑胶 条带并不是很亮啊?如何解决??影不影响后续酶切?
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深圳的东北人
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zhuangkai520

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by -字仲康 at 2014-08-07 21:44:03
不是很亮的原因有多种的  用不同的额试剂盒提取质粒是会有不同的效果的 亮度和条带的单一性也会有所不同  再有就是菌体的浓度太低 也会影响到质粒的亮度
当觉得质粒亮度不够的时候  可以在酶切的时候加大加入质粒 ...

那酶切时间是多长呢?还有酶的量?
深圳的东北人
17楼2014-08-08 11:35:32
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zhuangkai520

金虫 (小有名气)

忘了说,在最后EB溶解质粒时加了RnaseA
深圳的东北人
2楼2014-08-05 15:28:36
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
“最后EB溶解DNA的”,大哥,你不要吓我啊,是TE吧,2ug/ul浓度很可以了,酶切绝对没问题啊
3楼2014-08-05 16:39:25
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zhuangkai520

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by songzuowei at 2014-08-05 16:39:25
“最后EB溶解DNA的”,大哥,你不要吓我啊,是TE吧,2ug/ul浓度很可以了,酶切绝对没问题啊

呀呀,不是溴化乙锭。。是哪个提取试剂盒里的
深圳的东北人
4楼2014-08-05 16:53:05
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