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求助 转基因鉴定实验
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各位大虾，我成功将基因利用农杆菌浸染方法转化进拟南芥，但是在T0代鉴定阳性植株的时候出现了问题，特地各位请教。大致情况是这样的。 我将所提取的RNA反转录得到cDNA，同时做了一个对照，两管唯一的区别就是对照的管中未加反转录酶。我分别利用这两管做模板进行PCR扩增（引物为克隆目的基因时所用引物），结果两个均可以扩增出目的基因大小的条带，并且对照那管的条带亮度比cDNA做模板的条带要亮，我重复了3次均是这样。一直未找到合理的解释。 今天我又将对照的那管补加上反转录酶，并且75度10分钟，然后做模板进行PCR，结果跟以前的一样，还是比cDNA做模板亮！人快疯了！ 希望大哥大姐们多多指点小弟啊，谢谢谢谢 [ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:21 ] |
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