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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 双酶切
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baoyu166

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2014-08-01 15:51:32
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柠萌粉

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-08-01 16:41:07
测之前 之后都用nanodrop测一次浓度，你浓度多少啊，酶切的样品浓度很高吗，还不行就弄个大胶孔，多做几个重复一起回收
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2楼2014-08-01 16:26:45
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-01 17:16:44
1 如果连的基因本身就小，切出来比载体暗很正常。
2 酶切体系中增大模板的添加量

[ 发自小木虫客户端 ]
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大家相互帮助哈
3楼2014-08-01 16:51:58
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usky_4

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-08-01 23:57:32
1. 条带很淡可能是你本身的模板量就很低，或者染色剂加的少，重点在于你回收之后能有多少
2. 如果你的基因很小的话，条带浅是正常的。比如你从10k上面切下500bp，就算你加10ug的模板，切下来也就只有500ng，再加上点损耗的话，在胶上也不会很亮
3. 测模板的浓度，加大酶切体系，加多模板量
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下次再见面的时候，我们一定会笑着相遇吧
4楼2014-08-01 17:57:27
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baoyu166

禁虫 (初入文坛)
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5楼2014-08-02 13:28:01
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