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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱
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晶晶亮585

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱 已有17人参与

高效液相上用梯度方法检测有关物质，主峰出峰时间总是飘，更换了流动相及色谱柱，检查了色谱仪各接口处也无漏液现象，请各位高手给指点下，到底是什么原因？谢谢

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1楼 2014-07-31 12:14:07
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朗姆蛋糕

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该从两个方面下手排查问题：
1.仪器方面，包括柱压柱温，泵的好坏，色谱柱问题等。比较简单的方法就是换一台仪器按原方法再跑几次。如果换的仪器比较问题，说明是原来仪器的问题，这样比较容易找到原因。
2.从样品和流动相下手看能否解决。样品是否特殊，流动相对色谱柱影响大不大，相关操作如排气泡洗针等是否按步骤进行。

另，HPLC仪器不稳定很正常，可以找相对熟悉的人来进行调整。如果峰位置差的不是很多，可以多跑几针待仪器稳定后再用，一般第一针都不太稳定。
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不要因为走的太远，忘了我们为什么出发
23楼2014-08-04 21:47:57
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吊儿郎当176

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人认为有以下几点原因：
1、仪器周围环境的改变如温度变化（空调的开与关）、发生了较为严重的晃动等；
2、流动相和稀释剂的PH（如果可以最好用流动相做溶剂，加缓冲盐调节PH）；
3、每次样品进样浓度是否一致；
3、流动相是否混匀、色谱柱的平衡等。
以上是个人的一些观点，希望对你有所帮助！
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2楼2014-07-31 12:54:29
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晶晶亮585

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 吊儿郎当176 at 2014-07-31 12:54:29
个人认为有以下几点原因：
1、仪器周围环境的改变如温度变化（空调的开与关）、发生了较为严重的晃动等；
2、流动相和稀释剂的PH（如果可以最好用流动相做溶剂，加缓冲盐调节PH）；
3、每次样品进样浓度是否一致 ...

你说的这几条我已经查看过了，流动相不用调ph且进样浓度几乎一样，并且也更换了进样通道，可还是在飘，郁闷中...

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3楼2014-07-31 13:20:28
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吊儿郎当176

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 晶晶亮585 at 2014-07-31 13:20:28
你说的这几条我已经查看过了，流动相不用调ph且进样浓度几乎一样，并且也更换了进样通道，可还是在飘，郁闷中...
...

你确定你的流动相不会跟你的物质发生反应或物质在流动相中分解之类的吧？
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4楼2014-07-31 13:26:40
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