4楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-31 14:58:30
所以我猜测可能你的电转条件不合适 你再摸索一下电转条件，转化效率低的话，你可能随机挑了几个菌去测序，这几个菌都没转进去也是有可能的，你重新电转，通过抽酵母基因组方式阳性鉴定后，若鉴定出阳性就没问题了...

8楼: Originally posted by 圆yy at 2014-07-31 22:48:45
基因组提取了先做个pcr看看，能不能有目的基因在里面？？？如果没有或者有，在决定吧。分子实验熬得就是时间和经历

9楼: Originally posted by 崔永霞 at 2014-08-01 09:05:48
首先，非常感谢你的回复。有几个问题还想请教一下：1：47个菌用zeocin 梯度筛选是怎么个做法？ 2：我送的是菌液，测序结果单里面说的是测序反应失败，而且我也在测序单上备注了这是毕赤酵母X33菌液。3：我是转了六 ...

13楼: Originally posted by shyh1983 at 2014-08-01 10:47:11
zeocin 梯度筛选：可以把47个转化子用牙签挑到已加入200ulYPD液体的96孔板中（可以加入100ug/mlzeocin，也可以不加，如不加，操作注意无菌），30℃培养2-3天。在将此培养菌液稀释40倍，取1ul点在0.25、0.5、1.0、2 ...