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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

[求助] 重叠PCR 已有8人参与

做重叠PCR,最后一步怎么也合不到一起,两个片段一个三百多一个四百多。做了各种梯度,touch down等,出来目的条带,但是非常淡,而且靠近一百左右有一条小带。希望有经验的朋友帮忙。
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smdsfy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-31 20:22:12
两个片段要切胶纯化,而且要看得见条带,最好测一下浓度,把握好两个片段的比例,然后再一起P,祝你成功!
10楼2014-07-31 16:19:07
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smdsfy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-07-31 21:47:06
必须切胶纯化吗,我的两个片段跑胶看的话也很纯,没有其他杂带...

对,关键还有引物及引物及引物二聚体的影响 啊
34楼2014-08-01 12:58:29
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