应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 原核表达
51/1返回列表
查看: 1679  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 已有2人参与

请问各位大神，我是做原核表达上游也就是负责蛋白的表达，在做小试的时候 4ml LB培养基+200ul菌液，0.5mMIPTG，做两个温度，20℃，37℃。出来的结果是20℃有表达。在扩大培养的时候，按照小试的条件20℃培养，可是结果就是没有表达，试了好几次都不成功，为了防止是其表达量小，把收集的菌体试着让纯化的同事的做了下，确实木有蛋白呀！真的不知道了，求助~~~~~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-07-30 20:52:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 柠萌粉 at 2014-08-01 10:50:03
扩大培养的时候，用大点的容器去摇，再微调下摇速吧...

扩大培养的时候我们用的是2L的锥形瓶里面装的800ml培养基，这个应该不小了吧
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-01 19:24:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有的蛋白原核表达不了，可以选择真核表达

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-07-30 21:00:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小苹果168 at 2014-07-30 21:00:22
有的蛋白原核表达不了，可以选择真核表达

可是小试有表达吖，到了扩大培养就就没有了
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-31 22:03:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠萌粉

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 我要睡觉 at 2014-07-31 22:03:50
可是小试有表达吖，到了扩大培养就就没有了...

扩大培养的时候，用大点的容器去摇，再微调下摇速吧
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-01 10:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:23 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:14 by o3EMxHUAQDtS
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:12 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭