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bkli

铜虫 (小有名气)

[交流] 原核表达载体双酶切有问题

最近试验不顺利,原核表达载体PGEX用BamHⅠ和NotⅠ酶切,结果老是出现3条带,缓冲液和酶都换过了,也不知道是什么问题,不知道大家有没有遇到过这种问题,请教一下大家,给点宝贵意见,谢谢。
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dawei988

铜虫 (小有名气)

载体中是否有这两个酶切位点啊?
还有就是序列中除酶切位点是否还有这其中的酶切位点啊
6楼2008-04-08 13:06:55
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ypan

木虫 (著名写手)

你的问题说明的不是很清楚!可以把你的反应体系和反应时间贴出来看看吗?
2楼2008-04-07 15:43:19
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bkli

铜虫 (小有名气)

40ul体系
DNA 16ul
K Buffer 2ul
BSA      4ul
水         16ul
酶       各1ul

反应时间从3小时到8小时都试过
3楼2008-04-07 17:29:55
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

三条带多大?
最好把电泳图贴上
4楼2008-04-07 19:44:17
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