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qiaomuzhu

金虫 (正式写手)

[求助] 想问一下关于Hepes-NaOH的pH问题 已有1人参与

最近在做蔗糖合酶的活性,在文献中看到植物中这种酶的最适pH一般在8.0-9.5,也有一部分文献用pH 7.5的,我想咨询一下,如果我想做个梯度,我能否用Hepes-NaOH做缓冲液,把pH值从7.5一直往上调到9.5,因为我查到Hepes的缓冲能力在6.8-8.2之间,所以产生了这个疑问。
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
qiaomuzhu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-28 12:06:13
完全可以,然后测定不同PH下酶的活性,选择最佳PH值
2楼2014-07-28 09:40:58
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qiaomuzhu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-28 09:40:58
完全可以,然后测定不同PH下酶的活性,选择最佳PH值

能讲一下原因吗

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-28 18:44:42
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-29 16:12:03
qiaomuzhu: 金币+9, ★有帮助 2014-08-14 18:32:07
引用回帖:
3楼: Originally posted by qiaomuzhu at 2014-07-28 18:44:42
能讲一下原因吗
...

酶我也做过几个,算是小有经验,这些酶我们一般要配置两种buffer,一个是贮存buffer一个是反应buffer,在这buffer的组分是根据酶的特性选择的,很重要的原则是保证酶发挥最大活性和保存时间最长。Hepes-NaOH这玩意作用可能有2:一本身就是调节PH的二是提供Na离子
4楼2014-07-29 14:22:52
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-29 14:22:52
酶我也做过几个,算是小有经验,这些酶我们一般要配置两种buffer,一个是贮存buffer一个是反应buffer,在这buffer的组分是根据酶的特性选择的,很重要的原则是保证酶发挥最大活性和保存时间最长。Hepes-NaOH这玩意 ...

不知道可否分享下你的经验呢?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2014-07-29 16:12:45
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qiaomuzhu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-29 14:22:52
酶我也做过几个,算是小有经验,这些酶我们一般要配置两种buffer,一个是贮存buffer一个是反应buffer,在这buffer的组分是根据酶的特性选择的,很重要的原则是保证酶发挥最大活性和保存时间最长。Hepes-NaOH这玩意 ...

这个我知道,请问Hepes-NaOH的pH值超过Hepes的缓冲范围也行吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-07-29 20:04:05
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