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悠悠6690

新虫 (小有名气)

[求助] 求醋酸磷酸钾缓冲液配方已有1人参与

测蔗糖中性转化酶，和酸性转化酶，里面要求80 mM/L  acetate-K3PO4(pH 4.5 or 7.5），不会配啊！跪求！

[ Last edited by xbqewpq on 2012-9-4 at 14:40 ]
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1楼2012-09-03 18:32:21
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songyuze0319

金虫 (正式写手)
★
xbqewpq: 金币+1, 感谢分享~~ 2012-09-04 14:40:19
不知你那儿有没有酸度计，如有的话，你可事先分别配好0.08M/L也就是80mM/L的醋酸和磷酸钾，首先来个大致1:1的比例混合，pH4.5的缓冲液，醋酸肯定要多些，一边加醋酸，一边用酸度计调直至达到pH4.5；同理配置pH7.5的缓冲液，磷酸钾肯定要加多些...不难的。
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2楼2012-09-04 10:23:40
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悠悠6690

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by songyuze0319 at 2012-09-04 10:23:40
不知你那儿有没有酸度计，如有的话，你可事先分别配好0.08M/L也就是80mM/L的醋酸和磷酸钾，首先来个大致1:1的比例混合，pH4.5的缓冲液，醋酸肯定要多些，一边加醋酸，一边用酸度计调直至达到pH4.5；同理配置pH7.5的 ...

终于等到高人了，实验室是PH计有的，昨天晚上直接用磷酸二氢钾80mM定容到1升水里，ph都快到4.5了。文献上的80mM/L是指磷酸钾的浓度还是醋酸的浓度呢，还是两个的和？您说先1:1配是指质量比还是体积比？
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3楼2012-09-05 00:52:54
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悠悠6690

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by songyuze0319 at 2012-09-04 10:23:40
不知你那儿有没有酸度计，如有的话，你可事先分别配好0.08M/L也就是80mM/L的醋酸和磷酸钾，首先来个大致1:1的比例混合，pH4.5的缓冲液，醋酸肯定要多些，一边加醋酸，一边用酸度计调直至达到pH4.5；同理配置pH7.5的 ...

您的意思是指80mM/L是指两种物质的浓度总和。1：1是液体体积比。明白怎么弄了。我还想请教一个问题200mmol/L Hepes-NaOH 7.5 的缓冲液中的200mm/L就不是也是将Hepes和NaOH 分别配成200mm/L然后兑一起呢，谢谢了，没金币了，下次有了再一起给
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4楼2012-09-05 01:13:57
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songyuze0319

金虫 (正式写手)
我看你说的是磷酸三钾，你没搞错吧，磷酸氢钾与磷酸三钾肯定是不一样的。你问的是指两物质的总浓度。一般情况我们为了方便配置，就把两种物质分别配成该浓度，然后按一定体积混合，借助酸度计配成所要的缓冲液。
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5楼2012-09-05 08:26:41
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songyuze0319

金虫 (正式写手)
磷酸二氢钾本身就是显酸性的，你要用磷酸钾K3PO4, 它是显碱性的，而醋酸显酸性，配pH小于7的缓冲液，同等浓度的溶液，醋酸体积要大于磷酸钾；配pH大于7的缓冲液，同等浓度的溶液，醋酸体积要小于磷酸钾。希望你的问题能圆满解决！
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6楼2012-09-05 08:48:25
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悠悠6690

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by songyuze0319 at 2012-09-05 08:48:25
磷酸二氢钾本身就是显酸性的，你要用磷酸钾K3PO4, 它是显碱性的，而醋酸显酸性，配pH小于7的缓冲液，同等浓度的溶液，醋酸体积要大于磷酸钾；配pH大于7的缓冲液，同等浓度的溶液，醋酸体积要小于磷酸钾。希望你的问 ...

您太牛了,问了好几个博士都说没配过这个缓冲液,纠结了两天了,呵呵,我用磷酸二氢钾是因为师姐说是用磷酸缓冲液和醋酸配，我也不太相信，就试了一下，现在肯定她说的不对了，还是您说的有道理。问题解决了，谢谢您了
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7楼2012-09-05 10:33:26
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songyuze0319

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 悠悠6690 at 2012-09-05 10:33:26
您太牛了,问了好几个博士都说没配过这个缓冲液,纠结了两天了,呵呵,我用磷酸二氢钾是因为师姐说是用磷酸缓冲液和醋酸配，我也不太相信，就试了一下，现在肯定她说的不对了，还是您说的有道理。问题解决了，谢谢您了...

你夸的额都不好意思了！只要你的问题解决了就好。很愿意与虫虫们交流学习，祝你学业进步，一切顺利！
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8楼2012-09-06 08:19:59
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小兔子000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

能具体说一说80 mM/L  acetate-K3PO4(pH 4.5 or 7.5）怎么配的吗   我搞不懂   万分感谢啊！
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9楼2014-03-11 17:34:50
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