24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 342  |  回复: 5
当前主题已经存档。

skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 原核表达的条带问题

大家好,我最近做了个关于原核表达的实验,经过SDS-PAGE分析,表达出来的条带并不是单一的条带,而是弥散到整个电泳条带中,而未经诱导的大肠杆菌条带却比较专一,请问这是什么原因呢?怎么改进?或者我的条带就根本没表达出来呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tody4617

木虫 (小有名气)

一根筋家族之独根草

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
我也在做BL21原核表达
1你说未诱导条带清晰,是足够清晰还是大概看的清楚?如果是后者,那么染色长一些,4-5小时,脱色一晚上,如果是前者,看看是不是你做胶有问题,蛋白可以从空的四周扩散出去,造成弥散.
2有一种情况,是你根本没诱导出来,我第一次做的时候,就用的别人的菌,怎么也出不来,后来人家告我说保错菌了,郁闷!
3还有种可能,你诱导的蛋白分子量太大,胶没办法分离开,进而导致一片.
票子-房子-车子-婆子-儿子
2楼2008-04-06 20:15:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)

我想知道诱导跟温度以及摇菌速度有没有关系.我的胶应该是没问题
3楼2008-04-06 22:44:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tody4617

木虫 (小有名气)

一根筋家族之独根草

37度 210转
票子-房子-车子-婆子-儿子
4楼2008-04-07 08:35:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tody4617

木虫 (小有名气)

一根筋家族之独根草

37度 210转
票子-房子-车子-婆子-儿子
5楼2008-04-07 08:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)

第一:看转化了目的片断的表达菌株是否表达了,要依据表达载体是否需要加入诱导物质;
第二:在37度,200转左右,三个小时即可(菌株表达了目的蛋白,再从温度等因素来摸索条件,以得到可溶蛋白)
第三:电泳缓冲液要用新的(新配制,不超过2个月;新稀释的),我跑过像你说的那种胶,发现试电泳缓冲液的原因
祝你成功哦!
6楼2008-04-07 09:07:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 skkyy88888 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601材料工程找调剂 +9 oatmealR 2026-03-29 9/450 2026-03-29 12:04 by 汲河修士
[考研] 0856求调剂 +7 楒桉 2026-03-28 7/350 2026-03-29 08:28 by fmesaito
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 0703化学求调剂 +9 奶油草莓. 2026-03-22 10/500 2026-03-28 13:30 by 唐沐儿
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +7 麻辣鱿鱼 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:17 by zllcz
[考研] 求调剂 +8 张zz111 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:41 by fmesaito
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +7 18419759900 2026-03-25 8/400 2026-03-27 16:38 by 18419759900
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 材料学硕,求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
信息提示
请填处理意见