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bioaugustdj

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有可能引物不合适,我以前做实验也遇到过,后来发现引物和模板就不对,楼主认真检查检查。
朝着目标前进,不要忘了来时的路。
21楼2014-07-28 14:57:26
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by bioaugustdj at 2014-07-28 14:57:26
有可能引物不合适,我以前做实验也遇到过,后来发现引物和模板就不对,楼主认真检查检查。

嗯,应该查查,谢谢
22楼2014-07-29 08:23:31
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

可能你的样品中的DNA模板量处于PCR检测的临界值,介于有和没有之间。
23楼2014-07-29 11:22:13
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
23楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-07-29 11:22:13
可能你的样品中的DNA模板量处于PCR检测的临界值,介于有和没有之间。

嗯,确实,含量很低
24楼2014-07-30 21:44:29
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by usky_4 at 2014-07-25 09:53:20
哈哈,应该的嘛。我昨天也一直忘了说,就算他们没测浓度你自己还是可以拿去nanodrop上测一下的嘛。不过你说条带暗的话应该浓度不会太高,一般100-200ng就可以看到清晰的条带的,这个量用来做模版足够了。你跑胶看模 ...

你好,我的克隆出来了,测序结果也正确的。之前做的调整都不行,后来我直接重头开始做的,自己一段一段合成的,就是最后一段有杂带,我浓缩以后直接酶切,然后切胶回收的。早知道前面就不浪费时间了,直接自己做,呵呵。不过实验中我的模板有的需要稀释才能出来,有的不用稀释,温度都没变过,最后一步合成做了梯度,然后取最好的温度P的,然后片段就按前面说的处理的。还有就是我的最后一步又重新合成了两个短的引物,这样整个片段更容易P出来,效果会好点。嗯,就这么多了,呵呵。
25楼2014-08-16 20:56:12
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