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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR有时能出来带有时出不来
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

[求助] PCR有时能出来带有时出不来 已有8人参与

最近做一个PCR，很难做，要么能出来条带，很暗，要么完全看不到条带，试了各种体系，模板是上次同学P出来的，因为条带也暗，没有稀释过，反正出不来。偶尔一次用出来的条带再p，完全没有。想哭啊，现在模板都快用完了，怎么办呀。
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1楼 2014-07-24 17:50:57
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bioaugustdj

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有可能引物不合适，我以前做实验也遇到过，后来发现引物和模板就不对，楼主认真检查检查。
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朝着目标前进，不要忘了来时的路。
21楼2014-07-28 14:57:26
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古木宁天

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-24 21:24:11
确定延伸时间足够？
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懒
2楼2014-07-24 18:09:20
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 古木宁天 at 2014-07-24 18:09:20
确定延伸时间足够？

嗯是的，而且普通PCR出不来，我用的是TD
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3楼2014-07-24 18:21:10
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usky_4

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
泡菜肉丝(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-28 11:14:37
你的模板有测过浓度么？是否测序过？上次p出来的条带暗的话，很有可能模板本身就有问题。你同学的条带也并不一定可信。
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下次再见面的时候，我们一定会笑着相遇吧
4楼2014-07-24 19:54:55
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