24小时热门版块排行榜    

查看: 2725  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

coffee159

金虫 (小有名气)

[求助] 起始密码子放在酶切位点前 已有2人参与

想要表达一批蛋白,但这些蛋白中都没有起始密码子,而我的载体上面也没有起始密码子,所以想要对载体进行改造下,在酶切位点BamHI前面插入起始密码子ATG。不知道这样是否可行,如果这样的话就在新的蛋白中引入了3个氨基酸,对蛋白是否有影响?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

coffee159

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2014-07-23 21:33:29
你确定没有起始密码子?那它怎么表达的?

我要表达的是融合蛋白,前边是一段短肽,是没有起始密码子的
3楼2014-07-23 21:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
coffee159: 金币+1 2014-07-23 21:35:22
你确定没有起始密码子?那它怎么表达的?
2楼2014-07-23 21:33:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
coffee159(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:53:12
起始密码子是肯定要加的,载体上没有你就得手动加上,你在你酶切位点前面加一个ATG引入了3个AA,而你在酶切位点后面加ATG就引进一个M,你说哪个更合适?
一般用载体导致N端或者C端多了几个AA这都是不可避免的,你表达出来的叫重组蛋白又不是原始的蛋白,一般不影响的。
大家相互帮助哈
4楼2014-07-23 22:03:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-24 11:21:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by coffee159 at 2014-07-23 08:35:15
我要表达的是融合蛋白,前边是一段短肽,是没有起始密码子的...

你没有弄错?如果没有其实密码,那何来短肽,何来融合蛋白?
若有,你就不要加了,非要加的话也可以,但注意不要造成frame shift....
5楼2014-07-23 22:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见