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冯宝宝2014

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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charles08(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:36:28
我觉得原因有2个,一是上样量少,二是destain过程时间太久。但鉴于夏天做的胶图上连Marker都不是很清楚,而且背景色为紫色,所以是你褪色过程中没及时更换吸附纸,而只是长时间褪色,所以你可以试着缩短褪色时间,好运!
11楼2014-07-24 09:17:00
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 冯宝宝2014 at 2014-07-24 09:17:00
我觉得原因有2个,一是上样量少,二是destain过程时间太久。但鉴于夏天做的胶图上连Marker都不是很清楚,而且背景色为紫色,所以是你褪色过程中没及时更换吸附纸,而只是长时间褪色,所以你可以试着缩短褪色时间,好 ...

脱色一般是换4-5次脱色液
没有用过吸附纸啊
12楼2014-07-24 14:06:14
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 冯宝宝2014 at 2014-07-24 09:17:00
我觉得原因有2个,一是上样量少,二是destain过程时间太久。但鉴于夏天做的胶图上连Marker都不是很清楚,而且背景色为紫色,所以是你褪色过程中没及时更换吸附纸,而只是长时间褪色,所以你可以试着缩短褪色时间,好 ...

一般脱色至少6-8个小时
13楼2014-07-24 14:06:59
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胶没什么问题,问题在蛋白上样量,染色方面。
14楼2014-07-24 17:39:19
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-07-24 17:39:19
胶没什么问题,问题在蛋白上样量,染色方面。

加量?你们这种情况一般加多少?染色缩短时间?
15楼2014-07-24 17:41:32
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
15楼: Originally posted by charles08 at 2014-07-24 17:41:32
加量?你们这种情况一般加多少?染色缩短时间?...

右图那种10 μg蛋白质,左图那种像是转膜后剩余的蛋白。
16楼2014-07-24 18:28:48
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冯宝宝2014

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2014-07-27 19:28:11
引用回帖:
12楼: Originally posted by charles08 at 2014-07-24 14:06:14
脱色一般是换4-5次脱色液
没有用过吸附纸啊...

我做这部分实验室,不换脱色液,只是先前半小时左右换一次吸附纸(你可以用卫生纸放在胶上),然后每隔一个小时换一次吸附纸(大约4-6小时)或不换吸附纸过夜褪色都行,你的夏天胶图没啥问题,你不就是想知道蛋白质的分子量,下一次上样量多一些就行。
17楼2014-07-25 08:03:42
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 冯宝宝2014 at 2014-07-25 08:03:42
我做这部分实验室,不换脱色液,只是先前半小时左右换一次吸附纸(你可以用卫生纸放在胶上),然后每隔一个小时换一次吸附纸(大约4-6小时)或不换吸附纸过夜褪色都行,你的夏天胶图没啥问题,你不就是想知道蛋白质 ...

你们用什么做的吸附纸??我们是换脱色液的

上样量似乎关系不大吧,MARKER一直都上那么多啊,但是冬天都清楚

我要看的清楚些,至少边界清晰。

图片才能用上去
18楼2014-07-27 17:37:20
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forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我也得是温度太高蛋白有部分降解了。
19楼2014-07-27 19:55:09
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by forrestgump at 2014-07-27 19:55:09
我也得是温度太高蛋白有部分降解了。

图片类似吗?
20楼2014-07-28 08:35:35
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