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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 急a ，PCR不出现目的条带
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧
告诉你一个事实那就是，别人能够扩增出来的不一定你能够扩出来

特别是如果你参考的是国内的文献的话，更加可能扩不出来

还有就是希望你自己也多摸索条件，别人的不一定对

祝成功
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11楼2008-04-07 11:05:13
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bomeijuan

银虫 (小有名气)

再问？

再附上我的DNA图片，0.8%的胶，1KBmarker。
我是用TIANGEN细菌基因组提取试剂盒提取的动物肠道微生物，就图片来看，几乎没有DNA条带，而且涂带现象严重，而且有RNA等一些杂质。
当时动物肠道微生物在-20度保存了几个月，不知道是不是因为这个原因导致样品本身质量就不好，所以DNA提不出来，或者容易降解，乃至以后的PCR也扩增不出目的条带？
请各位帮我，实在是没有办法了，样品也用完了，怎么挽救？
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12楼2008-04-07 11:06:14
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haizhiou

你的DNA确实提的很差。我当时是用的植物叶片，也是放了几个月，提取效果也不好。新鲜的提取确实要好的多。
从你的DNA电泳图片上看，左边第二个泳道的好像还有点DNA。
不知道你做的是什么，我当时不用去除RNA，我试过去除RNA，结果DNA的量更少了，试验更是不好做。
我有些DNA提取的效果和你的差不多，我建议你用这个泳道的DNA做个浓度梯度试验，
要是再不行，那就只有从新提取了。
还有可以用你的DNA加别人的试剂跑一下PCR，看看能不能跑出来。
或者换一下仪器，让别人帮你做一下试试。
再不行，可以停一段时间再试试。
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13楼2008-04-07 15:08:18
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bomeijuan

银虫 (小有名气)

顶起来，求大家都来帮我

我是用试剂盒提的,用TIANGEN的提了效果不好，改用AXYGEN的试剂盒提还是一样的效果，不出现明显的DNA条带，不知道怎么办？
我取的肠道食糜样品，微生物提取出来以后就保存在-—20度的，也没有反复冻融。
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14楼2008-04-09 14:13:23
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