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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA电泳上样时刚加进去loading Buffer 的颜色就消失了 求大神指导
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寂寞又美好

金虫 (小有名气)

[求助] RNA电泳上样时刚加进去loading Buffer 的颜色就消失了 求大神指导 已有1人参与

各位前辈们你们好，小弟最近提RNA采用琼脂糖凝胶电泳跑图，今天加样时，将5×loading buffer 和1ulRNA样混合后加到点样孔时，刚刚加进去loading buffer的蓝色就消失了，今天总共跑了9个样品，就三四个能正常加样，我昨天刚刚做过预实验，跑的图挺好的，今天是怎么了，望有遇到过这种情况的前辈们帮我解惑一下，小弟跪谢了！今天和昨天跑的图附上了。

RNA电泳上样时刚加进去loading Buffer 的颜色就消失了  求大神指导
今天加样有问题的.jpg


RNA电泳上样时刚加进去loading Buffer 的颜色就消失了  求大神指导-1
昨天跑的.jpg
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等待.....
1楼 2014-07-21 17:11:11
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是你的胶穿孔了吧，都漏了估计
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-07-21 20:45:14
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liukun261

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2014-07-21 22:50:32
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寂寞又美好

金虫 (小有名气)
我今天又跑了几个，跑之前特意检查了胶，没有穿孔，但是还是有两个出现刚上样品，就消散的现象，并且还出现了个问题：我的1,6号点样孔的样品的OD260/280都达到了2.5左右，但是跑的图还很好，还有点2:1的关系。请问这是什么原因，是我的RNA浓度太高了吗，我提的是肌肉组织。
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等待.....
4楼2014-07-23 22:40:58
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人偶骑士

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 寂寞又美好 at 2014-07-23 22:40:58
我今天又跑了几个，跑之前特意检查了胶，没有穿孔，但是还是有两个出现刚上样品，就消散的现象，并且还出现了个问题：我的1,6号点样孔的样品的OD260/280都达到了2.5左右，但是跑的图还很好，还有点2:1的关系。请问这 ...

2.5……这个杂质略多啊，RNA的OD 260/280一般1.9到2.1比较正常
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道之所在，虽千万人吾往矣！
5楼2014-07-24 16:22:31
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Vivian_20114

新虫 (初入文坛)
为什么上样缓冲液会褪色呢2，我的也是
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6楼2014-12-08 00:32:52
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